Журнал пищевой промышленности и технологий

Абстрактный

Селективное удаление примесей фенилаланина из коммерческого κ-казеинового гликомакропептида методом анионообменной хроматографии

Накано Т. и Озимек Л.

Гликомакропептид бычьего κ-казеина (GMP), обнаруженный в сладкой сыворотке, представляет собой фосфорилированный гликопептид из 64 аминокислотных остатков. Поскольку в нем отсутствуют ароматические аминокислоты, включая фенилаланин, GMP считается важным источником аминокислот в рационе пациентов, страдающих фенилкетонурией. Однако имеется очень мало информации о приготовлении GMP без фенилаланина для потребления человеком. Поэтому это исследование было предпринято для удаления примесей, содержащих фенилаланин, из коммерчески доступного сырого GMP с помощью анионообменной хроматографии на диэтиламиноэтил (DEAE)-Sephacel. Результаты показали, что белки или пептиды, содержащие фенилаланин, не связываются с колонкой, в то время как большая часть GMP, составляющая 93% от общего количества восстановленной сиаловой кислоты, может связываться с колонкой. Очищенный GMP, составляющий в среднем 43% от сухого веса сырого GMP, содержал неопределяемый уровень фенилаланина. Анализы и электрофорез ацетата целлюлозы показали, что очищенный GMP представляет собой продукт с высоким содержанием сиаловой кислоты (в среднем 15,5% сухого веса). Гель-фильтрационная хроматография на Sephacryl S-100 и гель-фильтрационная ВЭЖХ на Superdex 75 подтвердили наши предыдущие выводы о том, что мономеры GMP образуют агрегаты и элюируются в виде одного пика с объемом элюирования, близким к объему элюирования димерного β-лактоглобулина (36,6 кДа). Был сделан вывод, что сырой препарат GMP может быть высоко очищен путем селективного удаления примесей фенилаланина с помощью хроматографии DEAE-Sephacel.