Лиша Чжао, Сюзанна М. Бадж, Абдель Э. Гали, Марианна С. Брукс и Дипика Дэйв
Важная кислая протеаза, пепсин, синтезируется и секретируется в желудочной мембране в неактивном состоянии, называемом пепсиногеном (ПГ), и применяется в пищевой и обрабатывающей промышленности, для экстракции коллагена, экстракции желатина и для регулирования усвояемости. Отходы переработки рыбы могут быть использованы для производства коммерчески ценных побочных продуктов, таких как пепсиноген. В настоящем исследовании была оптимизирована очистка пепсиногена из желудка красного окуня с использованием водных двухфазных систем (ATPS), образованных полиэтиленгликолем (ПЭГ) и солью при 4°C. Изучалось влияние типа соли (MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 и K 2 HPO 4 ) и концентрации (6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 15, 17, 19%) на разделение PG и оценивались такие параметры, как общий объем (TV), объемное отношение (VR), активность фермента (AE), содержание белка (Cp), удельная активность (SA), коэффициент распределения (Kp), кратность очистки (PF) и выход восстановления (RY). Тип соли и концентрация соли оказывали значительное влияние на каждый параметр. MgSO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 3 C 6 H 5 O 7 и K 2 HPO 4 требовали различных критических концентраций соли (9, 12, 12 и 10% соответственно) для образования двухфазных систем. TV и VR снижались с увеличением концентрации соли, поскольку соль образовывала водородные связи с молекулами воды и создавала более компактную и упорядоченную структуру воды. AE, CP, SA, PF и RY показали максимальный рост при промежуточной концентрации соли, в то время как KP имел противоположную картину. Самые высокие значения TV и AE были получены при 12% (NH 4 ) 2 SO 4 , в то время как самые высокие значения SA и PF были получены при 12% MgSO 4 . Самые высокие значения TV и Cp были получены при 12 и 15% Na 3 C 6 H 5 O 7 , соответственно. (NH 4 ) 2 SO 4 при 15% концентрации дал самый высокий RY (71,7%) и был выбран в качестве оптимального типа соли и концентрации. Таким образом, 15% (NH 4 ) 2 SO 4 18% PEG 1500 было оптимальной комбинацией ATPS и представило наилучшее разделение. Значения SA, PF и RY, полученные методом ATPS, были в два раза выше, чем полученные методом фракционирования сульфата аммония (ASF).