Технология ферментации

Абстрактный

Получение, очистка и частичная характеристика протеазы, устойчивой к органическим растворителям, из недавно выделенной Bacillus sp. BBXS-2

Абдул Саттар Куреши, Альтаф Ахмед Симаир, Чаудри Хайдер Али, Имрана Хушк, Джавайд Ахмед Хохар, Айяз Ахмад, Мухаммад Даниш, Чангруи Лу

Протеолитические ферменты применяются в различных отраслях промышленности, таких как производство моющих средств, кожи, продуктов питания, текстиля, косметики, фармацевтики и синтетической биотехнологии. Для удовлетворения коммерческих потребностей были сфокусированы штаммы микроорганизмов, имеющие высокую ценность с точки зрения рентабельного производства. В этом исследовании термофильный штамм Bacillus sp. BBXS-2 был активирован на простой питательной среде, а затем перенесен в среду Лурия-Бертани (LB). Максимальная концентрация протеазы 6723 ед./мл при оптимизированных условиях ферментации (патока, кукурузный экстракт, pH 9,0 и 45 °C). Результаты показали, что не наблюдалось никакой разницы в росте бактерий и титре протеазы при замене дрожжевого экстракта кукурузным экстрактом, поэтому таким образом можно сэкономить около 90% стоимости источника азота. Внеклеточный фермент был очищен до гомогенности из бесклеточного супернатанта путем осаждения сульфатом аммония с последующим диализом и ионообменной хроматографией, выход восстановления снизился со 100 до 22%, а кратность очистки увеличилась с 1 до 9,82. Фермент был активен в широком диапазоне pH и температур 8-12 pH и 30-60°C, с максимальной активностью при pH 10,0 и 60°C соответственно. Протеаза сохранила более 90% активности после инкубации при 40°C в течение 2 недель в присутствии (40% об./об.) органических растворителей, включая этанол, метанол и изопропанол. В целом, исследования показывают, что этот штамм является более перспективным кандидатом и обладает практической возможностью использования в промышленности.