Журнал биоэквивалентности и биодоступности

Абстрактный

Количественное определение фенспирида в плазме человека методом UPLC-MS/MS

Юрий Подпружников, Валерий Сабко, Владимир Юрченко и Игорь Зупанец

Разработан и проверен новый простой и быстрый метод сверхэффективной жидкостной хроматографии - тандемной масс-спектрометрии (UPLC-MS/MS) для количественного определения фенспирида в плазме человека. После простого осаждения белка ацетонитрилом аналит и внутренний стандарт (бупивакаин) разделялись на колонке ACQUITY UPLC ® BEH С18 (50 мм × 2,1 мм, 1,7 мкм) с использованием градиентной смеси ацетонитрила и воды (оба содержат 0,2% муравьиной кислоты) в качестве подвижной фазы при скорости потока 0,4 мл/мин. Время удерживания фенспирида и бупивакаина составило 0,64 и 0,87 мин соответственно. Детекция проводилась в положительном режиме путем мониторинга переходов m/z 261→105 для фенспирида и m/z 289→140 для бупивакаина. Нижний предел количественного определения составил 2 нг/мл с использованием аликвот плазмы объемом 200 мкл. Диапазон количественного определения фенспирида составил 2–500 нг/мл. Точность анализа в пределах и между испытаниями составила <9,5%, точность варьировалась от 91,5% до 112,4%, среднее восстановление от 99,3% до 101,9%. Аналит был стабилен в плазме человека после трех циклов замораживания/оттаивания и в течение 5 месяцев после хранения при температуре -70 °C. Метод был успешно применен для исследования биоэквивалентности дженериков и фирменных таблеток фенспирида с покрытием.