Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

TRA-1-60+, SSEA-4+, POU5F1+, SOX2+, NANOG+ Клоны плюрипотентных стволовых клеток в эмбриональных карциномах яичек

Марек Малецки, Ксения Томбокан, Марк Андерсон, Раф Малецки и Майкл Бошен

Введение: Рак яичек в настоящее время является наиболее частым новообразованием и основной причиной заболеваемости у мужчин в возрасте 15-35 лет. Его заболеваемость растет. Эмбриональная карцинома является его наиболее злокачественной формой, которая может быть резистентной или может развить резистентность к терапии, что приводит к рецидивам. Предполагается, что раковые стволовые клетки являются движущей силой этих явлений. Конкретная цель: Конкретной целью этой работы была идентификация и изоляция спектров отдельных живых раковых стволовых клеток, которые были получены непосредственно из биопсий пациентов, с последующим тестированием их плюрипотентности. Пациенты-методы: Биопсии были получены от пациентов с клиническими и гистологическими диагнозами первичных, чистых эмбриональных карцином яичек. Антитела, нацеленные на TRA-1-60 и SSEA-4, были биоинженерными для придания магнитного или флуоресцентного эффекта. Поверхностное проявление клеток TRA-1-60 и SSEA-4 анализировалось с помощью многофотонной флуоресцентной спектроскопии (MPFS), проточной цитометрии (FCM), иммуноблоттинга (IB), ядерной магнитно-резонансной спектроскопии (NMRS) и рентгеновской спектроскопии полного отражения (TRXFS). Отдельные живые клетки выделялись с помощью магнитной или флуоресцентной сортировки с последующим их клональным расширением. Транскрипты генов OCT4A, SOX2 и NANOG анализировались с помощью qRTPCR, а продукты — с помощью IB и MPFS. Результаты: Клоны клеток с выраженным поверхностным проявлением TRA-1-60 и SSEA-4 были идентифицированы и выделены непосредственно из биопсий, полученных от пациентов с диагнозом чистой эмбриональной карциномы яичек. Эти клетки продемонстрировали высокий уровень транскрипции и трансляции генов плюрипотентности: OCT4A, SOX2 и NANOG. Они сформировали эмбриональные тельца, которые дифференцировались в эктодерму, мезодерму и энтодерму. Заключение: В чистых эмбриональных карциномах яичек, полученных непосредственно от пациентов, мы идентифицировали, изолировали с высокой жизнеспособностью и селективностью и профилировали клоны плюрипотентных стволовых клеток. Эти результаты могут помочь в объяснении резистентности к терапии и рецидивов этих новообразований, а также в разработке целевой персонализированной терапии.