Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

TRA-1-60+, SSEA-4+, Oct4A+, Nanog+ Клоны плюрипотентных стволовых клеток в эмбриональных карциномах яичников

Марек Малецки, Марк Андерсон, Майкл Бошен, Сонвон Со, Ксения Томбокан и Раф Малецки

Введение:
Эмбриональная карцинома яичников (ЭКО), чистая или смешанная с другими опухолями, является смертельным гинекологическим раком.
Конкретная цель: Конкретной целью этой работы была идентификация, изоляция, клональное расширение и молекулярное профилирование плюрипотентных клеток в эмбриональных карциномах яичников.
Пациенты и методы: Образцы были собраны у пациентов, у которых клинически и гистопатологически была диагностирована запущенная, чистая ЭКО. Подготовка образцов была инициирована отрицательным отбором клеток с помощью MACS, при использовании суперпарамагнитных scFv против фосфатидилсерина (PS) и dsDNA, CD45, CD34, CD19, CD14, и положительным отбором, при использовании суперпарамагнитных scFv для TRA-1-60 и SSEA-4. Дисплей поверхности клеток анализировали с помощью проточной цитометрии (FCM), иммуноблоттинга (IB), многофотонной флуоресцентной спектроскопии (MPFS), ядерной магнитно-резонансной спектроскопии (NMRS) и рентгеновской спектроскопии полного отражения (TRXFS). Транскрипты OCT4A и Nanog анализировали с помощью qRTPCR и MPFS. Человеческие плюрипотентные эмбриональные стволовые клетки (ESC), человеческая плюрипотентная эмбриональная карцинома яичек (ECT), здоровые ткани яичника (HTO), здоровая ткань яичек, мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и мононуклеарные клетки костного мозга (BMMC) служили в качестве контролей.
Результаты: Изученные эмбриональные карциномы яичников (ECO) содержали клетки со значительно более высокой интенсивностью поверхностного дисплея TRA-1-60 и SSEA-4 по сравнению с BMMC, PBMC и HTO, но схожие с плюрипотентными ESC и ECT. Их морфология и ультраструктура соответствовали гистопатологическим диагнозам. Более того, эти клетки были значительно более сильными экспрессорами Oct4A и Nanog по сравнению с PBMC, BMMC и HTO, но схожи по сравнению с плюрипотентными ESC и ECT. Клетки ECO образовали эмбриоидные тельца, которые дифференцировались в эктодерму, мезодерму и энтодерму. Эти клетки были вынуждены дифференцироваться в мышцы, эпителий и нейроны.
Заключение: В настоящем документе мы выявили наличие и идентифицировали молекулярные профили клонов плюрипотентных стволовых клеток в эмбриональных карциномах яичников. Эти результаты должны помочь нам в уточнении молекулярной диагностики этих смертельных новообразований.