Хиронобу Кикучи, Гаку Огури, Юмико Ямамото, Нами Такано, Томофуми Танака, Масао Такахаси, Фумитака Накамура, Тацуя Ямасоба, Иссей Комуро, Сётаро Оби, Тошиаки Накадзима
Предыстория: Гипертермия может влиять на функции жировых клеток, а затем на адипогенез. Термочувствительные белки транзиторного рецепторного потенциала (TRPs), такие как TRPV1-4, играют жизненно важную роль в клеточных функциях. Мы исследовали экспрессию термочувствительных TRPVs и их роль в продукции IL-6 в преадипоцитах и дифференцированных адипоцитах мыши 3T3-L1.
Методы: Были выполнены традиционный и количественный анализ ОТ-ПЦР в реальном времени, вестерн-блоттинг, сортировка клеток с активацией флуоресценции, иммуноцитохимическое окрашивание и измерения [Ca2+]i с использованием фура-2 AM.
Результаты: Обычный и реальный анализ ОТ-ПЦР показал наличие экспрессии TRPV1, 2 и 4. Вестерн-блоттинг и иммуноцитохимическое окрашивание также показали наличие транскрипта TRPV1, TRPV2 и TRPV4 в преадипоцитах 3T3-L1 и дифференцированных адипоцитах. Капсаицин, агонист TRPV1, пробенецид, агонист TRPV2, и GSK1016790A, агонист TRPV4, и 2-аминоэтоксидифенилборат (2-APB), селективный агонист TRPV1-3, увеличили [Ca2+]i. Эти изменения также были вызваны повышением внеклеточной температуры с 25°C до более 42°C. Обработка капсаицином, GSK1016790A и пробенецидом в течение 24 ч увеличила экспрессию IL-6 и секрецию в дифференцированных адипоцитах. Высокая температура от 25°C до более 42°C также индуцировала экспрессию белка IL-6.
Выводы: Настоящее исследование показывает, что жировые клетки обладают множественными термочувствительными TRPV (TRPV1, TRPV2 и TRPV4), которые могут играть жизненно важную роль в продукции IL-6. Таким образом, термочувствительные TRPV, по-видимому, являются новыми целевыми молекулами для стимулирования секреции IL-6 в жировых тканях.