Фармацевтика Аналитика Акта

Абстрактный

Метод термического Фурье-преобразования в инфракрасной области спектра быстро обнаруживает раннее начало конформационных изменений сывороточного альбумина человека, вызванных гликацией

Ю-Тин Хуан, Хуэй-Фэнь Ляо, Шунь-Ли Ван и Шань-Ян Линь

Многочисленные потенциальные ингибиторы для предотвращения образования конечных продуктов гликирования (AGE) были тщательно исследованы на предмет их особенностей in vitro и in vivo, но на их изучение ушло бы много времени. В настоящем исследовании была предпринята попытка использования уникальной комбинированной системы с термическим преобразованием Фурье-инфракрасного (FTIR) в качестве ускоренного метода одновременно определить зависимые от температуры конформационные изменения человеческого сывороточного альбумина (HSA) в смеси HSA-рибоза и изучить начало структурной трансформации из α-спиральных в β-слоистые структуры с использованием ингибиторов AGE или без них. Полученные результаты ясно показывают, что нативный HSA имел начальную температуру 96°C для необратимого термически индуцированного структурного перехода из α-спиралей в β-слои, тогда как смесь HSA-рибоза показала свою начальную температуру около 78°C из-за раннего возникновения гликирования. Однако начальная температура перехода α-спирали в β-слой постепенно изменялась с 78°C до 96°C путем увеличения количества диклофенака натрия или инозитола, что было близко к начальной температуре нативного HSA. Это подразумевает, что термически индуцированный переход от α-спирали к β-слою для HSA в смеси HSA-рибоза был эффективно предотвращен после добавления натрия или инозитола. Настоящее исследование также предполагает, что этот метод термической FTIR не только быстро ускоряет конформационные изменения смеси HSA-рибоза, но и напрямую определяет начальную температуру перехода α-спирали в β-слою в реальном времени. Эта уникальная термическая комбинированная система FTIR может быть полезным инструментом для скрининга и быстрой оценки конформационных изменений белков, вызванных гликированием, в одношаговом процессе.