Журнал патологии растений и микробиологии

Абстрактный

Сравнение антител, полученных против PLRV с помощью двух различных подходов — очистки вирусных частиц и рекомбинантного производства CP

Асель ДГ и Хафез ЭЭ

Серология является одним из важнейших методов, который широко используется в различных областях, особенно в сельском хозяйстве. Серологические методы, которые обычно широко используются из-за их специфичности в диагностике заболеваний и относительной простоты выполнения. Методы, широко используемые в вирусологии растений, включают иммуноферментный анализ, иммуноблот-анализ дот-блоттинга, иммуноспецифическую электронную микроскопию и иммуноблот-анализ тканей. Главным камнем серологического теста является антисыворотка, которая является либо моно-, либо поли-. Из-за высокой стоимости производства моноантисыворотки и ее низкой чувствительности тех, которые иммунизированы очищенными вирусными частицами, рекомбинантный белок может быть хорошей заменой. В этом исследовании мы стремились получить полисыворотку с использованием вирусных частиц и рекомбинантного белка оболочки вируса скручивания листьев картофеля, а также использовать обе при иммунизации кроликов по отдельности. Чувствительность, специфичность и реактивность двух полученных сывороток были протестированы в сравнении с полимеразной цепной реакцией в реальном времени. Результаты показали, что полисыворотки, полученные с помощью рекомбинантного белка оболочки, более специфичны и чувствительны, чем сыворотки, полученные с помощью очищенных частиц. Более того, результаты, полученные с помощью точечного и тканевого блоттинга, подтвердили результаты, полученные с помощью методов иммуноферментного анализа. Результаты полимеразной цепной реакции в реальном времени были аналогичны результатам, полученным с помощью серологических методов, за исключением времени и субстрата. В заключение следует сказать, что производство полисывороток с использованием рекомбинантного белка является простым, дешевым и чувствительным тестом для обнаружения флаконов в режиме онлайн.