Журнал патологии растений и микробиологии

Абстрактный

Связывание Ca2+-зависимой протеинкиназы с супрессором возбудителя фитофтороза картофеля, доказанное с помощью флуоресцентной корреляционной спектроскопии (ФКС), ингибирует НАДФН-оксидазу и генерацию активного кислорода в клетках картофеля

Наотака Фуруичи, Масатоши Ота, Хисакадзу Окамура, Тунэёси Хоригоме и Кадзутоши Ёкокава

Представляя супрессор для сверхчувствительной клеточной смерти растительной клетки, глюкан из Phytophthora infestans (Pi), сообщалось, что супрессор ингибировал накопление фитоалексина и сверхчувствительную клеточную смерть. Для оценки активации кальций-зависимой протеинкиназы (CDPK) после связывания супрессора из Pi, флуоресцентная корреляционная спектроскопия (FCS) была применена к одиночному GFP-CDPK и супрессору, меченому Alexa. Мы сконструировали химерный белок, тандемно слитый зеленый FP (GFP)-CDPK и супрессор с антителами (Abs) супрессора, мечеными Alexa 633. Двухцветная FCS дает информацию о совпадении спектрально двух флуоресцентных молекул на уровне одной молекулы. Здесь мы сообщаем, что для ингибирования НАДФН-оксидазы картофеля супрессор, связанный с пептидом CDPK (пептиды домена киназы I и III), CDPK фосфорилировал НАДФН-оксидазу в гелевом киназном анализе, и что генерация активного кислорода НАДФН-оксидазой была ингибирована супрессором. Это означает, что супрессор, ингибирующий HR из патогена растения, контролирует образование супероксидного радикала в растительной клетке с помощью сигнала фосфорилирования CDPK.