Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Ангиогенный потенциал внеклеточных везикул, полученных из жировых мезенхимальных стволовых клеток, модулируется основным фактором роста фибробластов

Татьяна Лопатина, Аврора Маццео, Стефания Бруно, Чиро Тетта, Наталья Калинина, Ренато Романьоли, Мауро Салиццони, Массимо Порта и Джованни Камюсси

Цель: Целью настоящего исследования было изучение эффектов основного фактора роста фибробластов (bFGF) на ангиогенные свойства внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых мезенхимальными стволовыми клетками (АСК), полученными из жировой ткани, в культуре.
Методы: Мы выделили ВВ из АСК (АСК-ВВ), культивируемых с bFGF (FGF-ВВ) или без bFGF (b-ВВ). Мы сравнили ангиогенное действие ВВ на микрососудистые эндотелиальные клетки человека (HMEC) in vitro с помощью анализа формирования капилляроподобной структуры и in vivo с помощью подкожной инъекции содержащего HMEC Матригеля мышам SCID. Мы проанализировали состав микроРНК ВВ с помощью ПЦР-матрицы и выбрали две микроРНК, измененные после стимуляции bFGF: miR-223 и miR-21. Мы трансфицировали HMEC коротким антисмысловым анти-miR-223 или имитирующим miR-21 для компенсации действия EV.
Результаты: In vitro общая длина и количество ветвей сосудоподобных структур, образованных HMEC, стимулированными FGF-EV, были значительно уменьшены по сравнению со стимуляцией b-EV, а структуры были значительно больше, чем после стимуляции b-EV. In vivo сосуды, образованные HMEC, стимулированными FGF-EV, были значительно меньше по количеству по сравнению с сосудами, образованными HMEC, стимулированными b-EV, но они были значительно больше по размеру и содержали клетки, положительные по гладкомышечному актину мыши. Мы обнаружили, что bFGF привел к молекулярным изменениям в ASCEV, характеризующимся снижением экспрессии ангиогенных факторов . Более того, стимуляция bFGF повысила экспрессию антиангиогенной miR-223 и снизила уровень проангиогенной miR-21. Эффекты FGFEV были антагонизированы ингибированием miR-233 и имитатором miR-21
Выводы: Результаты показывают, что условия культивирования могут изменять проангиогенную активность EV, полученных из ASC, изменяя их содержание белка и РНК. В частности, bFGF индуцирует выработку EV, которые стимулируют стабилизацию сосудов, а не увеличение их количества.