Генная технология

Абстрактный

Стратегии и передовой опыт клонирования малых РНК

Хуэй Дай, Вэйфэн Гу

Высокопроизводительное секвенирование стало стандартным и мощным инструментом для анализа нуклеиновых кислот, прежде всего, благодаря своей чувствительности и удобству. Малые РНК играют важную роль в регуляции клеточных и вирусных генов. Традиционные методы анализа малых РНК утомительны и часто не обладают точностью, специфичностью и чувствительностью для многих видов малых РНК. Поэтому высокопроизводительное секвенирование становится незаменимым инструментом для анализа малых РНК. Однако сложно создать надежную и репрезентативную библиотеку малых РНК для высокопроизводительного секвенирования, поскольку малые РНК обычно экспрессируются на крайне низких уровнях и часто содержат модификации, которые влияют на конструкцию библиотеки, что обычно приводит к смещенным показаниям. В этом обзоре сравниваются различные стратегии создания библиотек малых РНК высокого качества и надежности, а также даются рекомендации по наилучшей практике подготовки библиотек РНК для высокопроизводительного секвенирования.