Современная химия и приложения

Абстрактный

Короткий и надежный метод ВЭЖХ-УФ для определения концентрации рибавирина в сыворотке без стадии выпаривания

Абдул Рафик Хан, Али Аль-Отаим, Халид Мухаммед Хан, Шазия Мртаза, Сара Альтраиф, Валид Тамими, Вакас Джамиль и Ибрагим Альтраиф

Цель: Измерение рибавирина (RBV) важно для терапевтического мониторинга лекарственных средств у пациентов с гепатитом C. Разработан и проверен простой и быстрый метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для измерения концентрации рибавирина в образцах сыворотки без этапа испарения.

Дизайн и метод: Около 500 мкл образца сыворотки, 50 мкл внутреннего стандарта и 20 мМ буфера ацетата аммония (pH = 8,5) смешивали в течение 30 секунд и центрифугировали. Супернатант переносили в предварительно подготовленные картриджи с фенилбороновой кислотой для твердофазной экстракции. Все картриджи промывали дважды 1 мл 20 мМ буфера ацетата аммония под вакуумом, не превышающим 10 фунтов на кв. дюйм. Рибавирин и внутренний стандарт элюировали 300 мкл 3% муравьиной кислоты. Аликвоту 100 мкл вводили в систему ВЭЖХ.

Результаты: Метод был линейным в диапазоне 0,1-8,0 мг/л с 0,05 мг/л в качестве предела обнаружения. Коэффициент корреляции сравнения методов составил 0,975 со значением p 0,116, что свидетельствует о хорошей воспроизводимости результатов. Средняя точность была проверена при трех различных концентрациях и оказалась в пределах 107-110% для всех трех уровней. Эффективность экстракции составила 65,5% для рибавирина в диапазоне 0,1-8,0 мг/л и 71,2% для внутреннего стандарта при 50 мг/л. Внутрианализная точность была определена при 0,5, 2,5 и 5,0 мг/л, а % CV составил 2,2%, 5,0%, 4,5% соответственно. Воспроизводимость инъекции на трех уровнях составила 5,5%, 6,1% и 3,3%. Исключение этапа гравитационного потока и испарения сделало этот метод более быстрым и простым для рутинного анализа образцов рибавирина.

Заключение: Недавно разработанный метод ВЭЖХ оказался более быстрым, точным и чувствительным. Он применялся для определения уровня рибавирина в сыворотке у пациентов с гепатитом С в нашей больнице.