Кадзуки Исияма, Мика Огава, Хидефуми Като, Кёсуке Такэсита, Рюзо Уэда, Такаюки Накаяма*
Предыстория: Фетальная бычья сыворотка (ФБС) является наиболее распространенным фактором роста, используемым в клеточной культуре. Однако спрос на безксеносодержащие добавки для клеточной культуры для клинического использования, которые соответствуют стандартам надлежащей производственной практики, растет по мере расширения клеточной терапии. Человеческая сыворотка была предложена в качестве альтернативы ФБС. Из-за ограниченной доступности доноров и эффективного использования медицинских ресурсов мы попытались получить сыворотку из просроченной свежезамороженной плазмы (СЗП) и криосупернатанта (КС) и протестировали их в качестве заменителей ФБС.
Результаты: Мы обнаружили, что 1-часовая инкубация FFP или CS с физиологическим уровнем тромбина и хлорида кальция (CaCl 2 ) истощает практически весь фибриноген. Сравнительные исследования пролиферации с FBS и лизатами тромбоцитов человека (hPL) показали, что по сравнению с FBS сыворотка FFP проявляла схожие или более выраженные пролиферативные эффекты на 8 линиях клеток человека: мезенхимальные стромальные клетки, полученные из костного мозга (BMSC), мезенхимальные стромальные клетки, полученные из жировой ткани (ADSC), HeLa, 293T, MG-63, HL-60, K562 и Meg-A2, за исключением клеток Saos-2, тогда как сыворотка CS проявляла более слабые пролиферативные эффекты на клетки BMSC, ADSC и Saos-2. hPL стимулировал рост клеток BMSC и ADSC более энергично, чем сыворотка FFP и CS.
Выводы: СЗП- и ХС-сыворотку можно получать с помощью тромбина и CaCl2 быстро и экономно, не нанося вреда продуктам крови, и они могут служить эффективной альтернативой СБП для культивирования клеток человека.