Биоэнергетика: открытый доступ

Абстрактный

Рекомендации по краткосрочному культивированию жизнеспособных палочковидных кардиомиоцитов крысы

Рабия Джонсон, ФиваинкосиВуси Длудла, Кристо Джон Фредерик Мюллер, Фагри Февраль и Йохан Лоув

Первичные культуры изолированных взрослых кардиомиоцитов крыс in vitro становятся все более популярной моделью для изучения стрессоров сердечной мышцы. Эту модель можно легко использовать в контролируемой среде, а полученные результаты могут дать ценную информацию о патофизиологии заболеваний сердца. За последние годы было описано несколько усовершенствованных методик в разработке надежной техники, помогающей поддерживать кардиомиоциты в культуре. Однако, несмотря на эти достижения, культивирование первичных кардиомиоцитов остается сложной задачей. В этом исследовании мы представляем простой, но воспроизводимый метод выделения и культивирования жизнеспособных стержнеобразных кардиомиоцитов. Кардиомиоциты поддерживались в дополненной среде 199 с сывороткой плода быка или без нее. Их жизнеспособность оценивалась с использованием трипанового синего, а метаболическая активность измерялась с помощью анализа аденозин-5'-трифосфата. Результаты, полученные в этом исследовании, использовались для предоставления общих рекомендаций по избежанию ловушек, связанных с низким выходом кардиомиоцитов и последующей плохой культивируемостью кардиомиоцитов. Изолированные кардиомиоциты, культивируемые в присутствии фетальной бычьей сыворотки, сохраняли свою in vitro полосатую палочковидную морфологию в течение 72 ч в культуре, после чего они уплощались и расправлялись. В то время как кардиомиоциты, культивируемые в отсутствие фетальной бычьей сыворотки, оставались палочковидными до 120 ч.