Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Производство, очистка и характеристика L-аспарагиназы из морского эндофитного Aspergillus sp. ALAA-2000 при глубинной и твердофазной ферментации

Мерват Морси Аббас Ахмед, Наге Або Дахаб Ф, Тахер Таха М и Фарид Хасан С.М.

Среди всех эндофитных грибов, выделенных из морской мягкой губки Aplysina fistularis, 72,2% были способны продуцировать L-аспарагиназу. Среди всех полученных изолятов Aspergillus sp. ALAA-2000, гиперактивный продуцент противоракового агента L-аспарагиназы, при глубинной ферментации (SMF) и твердофазной ферментации (SSF) различных сельскохозяйственных отходов был выбран для оптимизации процесса экстракции; оптимизации физико-химических параметров, влияющих на продукцию L-аспарагиназ в SSF и оптимизации параметров очищенных L-аспарагиназ. Максимальная активность L-аспарагиназы 23,34 U/мл была выделена из сои с горячей водой при 40 °C и 150 об/мин в течение 30 мин при SSF и 30,64 U/мл при глубинной ферментации с использованием глюкозы в качестве источника углерода и аспарагина в качестве источника азота. Два типа L-аспарагиназы (AYA-1 и AYA-2) были очищены из культурального супернатанта Aspergillus sp. ALAA-2000 посредством осаждения сульфатом аммония и гель-фильтрационной хроматографии (сефадекс G-200). Молекулярные массы ферментов составили 25 кДа (AYA-1) и 31 кДа (AYA-2). Параметры очищенной L-аспарагиназы были оптимизированы для фермента AYA-1 (pH 6,0, стабильна при температуре от 30°C до 50°C в течение 60 мин, время реакции 15 мин и концентрация субстрата 1,275 мг/мл) и фермента AYA-2 (pH 10, стабильна при температуре от 30°C до 70°C в течение 60 мин, время реакции 15 мин и концентрация субстрата 1,275 мг/мл). В то время как ингибиторы металлопротеаз, хелатирующие агенты ЭДТА, не оказали никакого влияния на L-аспарагиназу. Эти данные свидетельствуют о том, что L-аспарагиназа не является металлопротеазой.