Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Получение, очистка и характеристика эндополигалактуроназы с помощью Bacillus subtillus

Наяб Мунир, Джаваид Асад М и Хайдри Ш.

Клеточная стенка растений состоит из сложных углеводов, таких как целлюлоза, гемицеллюлоза и пектин. Пектин — это сложный углевод, состоящий из единиц галактуроновой кислоты, связанных гликозидной связью. Для расщепления этого пектина микроорганизмам требуется много различных ферментов. Полигалактуроназа — это пектолитический фермент, катализирующий гидролиз α 1-4 гликозидной связи в полигалактуроновой кислоте путем добавления воды. Полигалактуроназа бывает двух типов: эндополигалактуроназа и экзополигалактуроназа. Эндополигалактуроназа катализирует внутреннюю α 1-4 гликозидную связь, а экзополигалактуроназа катализирует внешнюю α 1-4 гликозидную связь в молекулах пектата . Эндополигалактуроназа имеет различные применения, особенно в производстве фруктовых соков, используется для осветления сока, а также в пищевой промышленности для мацерации овощей. Эндо-ПГ, продуцируемый грибком, работает в кислой среде pH и при низкой температуре, но для применения эндо-ПГ в пищевой и швейной промышленности необходим фермент, который работает при высокой температуре, а также в щелочных условиях. В качестве контрольного штамма использовали Bacillus subtillus. Используя различные субстраты, такие как яблочная кожура, кожура редиса и цитрусовая кожура, был сделан вывод, что цитрусовая кожура производит максимальную концентрацию фермента. Дальнейшая характеристика показала, что EPG, продуцируемый Bacillus subtillus, имеет оптимальную температуру 60°C и оптимальный pH 5. Максимальная кратность очистки наблюдалась при гель-фильтрации. Молекулярная масса фермента составила 67 кДа. Vmax для EPG, продуцируемого Bacillus subtillus, составила 1,21 мг/мл, а Km — 2423 моль/мин/мг.