Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Оптимизация процесса производства L-глутаминазы; ингибитор опухолей из морского эндофитного изолята Aspergillus sp. ALAA-2000

Мерват Морси Аббас Ахмед, Тахер М. Таха, Наге Ф. Або-Дахаб и Фарид С.М. Хасан

L-глутаминазы в последнее время привлекли значительное внимание из-за их потенциальных применений. Все эндофитные грибы, извлеченные из морской мягкой губки Aplysina fistularis, были способны продуцировать L-глутаминазу. Во время программы скрининга Aspergillus sp. ALAA-2000 показал самые высокие уровни продукции L-глутаминазы. Продукция L-глутаминазы Aspergillus sp. ALAA-2000 была оценена при различных режимах и параметрах ферментации. Синтез L-глутаминазы был увеличен после оптимизации параметров ферментации. Горячая вода 40°C была лучшим выщелачивающим агентом, извлеченным из соевых бобов для продукции L-глутаминазы (21,89 U/мл) при твердофазной ферментации (SSF). Самая высокая активность L-глутаминазы (91,92 U/мл) была достигнута после двухдневного периода инкубации при глубинной ферментации (SmF). L-глутамин, декстроза, цистеин и хлорид магния поддерживали самую высокую продукцию L-глутаминазы Aspergillus sp. ALAA-2000 в SmF при pH 4 и 27 °C. Одиночный пик L-глутаминазы был получен из культурального супернатанта Aspergillus sp. ALAA-2000 посредством осаждения сульфатом аммония и колоночной хроматографии на DEAE-целлюлозе, что соответствует мономерной природе фермента L-глутаминазы. Параметры очищенной L-глутаминазы были оптимизированы следующим образом: pH 10, стабильность при 40 °C - 50 °C, время реакции 30 мин и концентрация субстрата 4,38 мг/мл. В то время как максимальный катион активатора - Na+, а различные концентрации ЭДТА не оказывают влияния на активность L-глутаминазы, что означает, что фермент L-глутаминаза был представлен как неметаллический фермент.