Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Получение моноклонального антитела против сайкосапонина С и создание метода его иммуноферментного анализа

Баопин Цюй, Цзяян Сай, Хуэйхуа Цюй, Шучен Лю, Цзиньцзюнь Чэн, Вэньчао Шань, Ян Чжао и Цинго Ван

Моноклональное антитело (МАб) 1E11D8 против сайкосапонина c (СС) было получено путем слияния клеток со спленоцитами и чувствительной к гипоксантину-аминоптерину-тимидину линией клеток мышиной миеломы SP2/0. Полученное анти-СС MAb-1E11D8 обладает новой характеристикой, которая показывает высокую специфичность к сайкосапонину c, сайкосапонину d и сайкосапонину a, трем основным олеанан-сапонинам в Radix Bupleuri. С использованием анти-СС MAb-1E11D8 был разработан надежный ИФА для обнаружения СС. Система показывает полный диапазон измерений от 156,25 нг·мл-1 до 2500 нг·мл-1 в случае СС в непрямом конкурентном ИФА (icELISA). Уравнение регрессии было y=-0,283 ln(C) +2,3301 с коэффициентом корреляции 0,99. Точность и достоверность метода icELISA оценивались по вариациям между повторениями от лунки к лунке (внутрианализ) и от планшета к планшету (между анализами). Полученные значения для этих параметров находились в пределах нормы (<10%). Коэффициенты извлечения варьировались от 99,82 до 103,59%. Метод ELISA был дополнительно проверен на пригодность для обследования ССД в традиционных китайских рецептах.