Журнал исследований и разработок в области аквакультуры

Абстрактный

Полипептидное профилирование белковой фракции сывороточного глобулина сома пангасиуса (Pangasius pangasius) и разработка иммуноконъюгата сывороточного глобулина против пангасиуса-HRPO для быстрого обнаружения бактериальной инфекции

Харреш Адикешавалу, Прадипта Пол, Сиддхартха Н. Джоардар и Джавахар Т. Абрахам

Бактериальные заболевания продолжают оставаться основным экономическим фактором для коммерческого разведения сома. Поэтому правильная диагностика заболеваний важна для эффективных мер лечения и предотвращения производственных потерь. Настоящее исследование направлено на фракционирование и характеристику сывороточных глобулиновых белков сома пангасиуса, Pangasius pangasius, с помощью фракционирования соли и анализа SDS-PAGE. Белковый профиль фракционированных сывороточных глобулиновых белков P. pangasius выявил в общей сложности 12 полос, а именно: 136,64, 120,58, 95,87, 79,92, 72,67, 63,04, 45,99, 43,32, 38,65, 34,82, 28,46 и 19,08 кДа. Иммуноконъюгат пероксидазы хрена (HRPO) против сывороточного глобулина пангаса (ASG) (иммуноконъюгат ASGHRPO) был приготовлен с помощью периодата натрия и повышения иммунной сыворотки против него у кролика. Серореактивность иммуноконъюгата ASG-HRPO была оценена с помощью дот-ИФА и прямого ИФА. В дот-ИФА развитие интенсивного цветного пятна было отмечено только при использовании иммуноконъюгата ASG-HRPO либо в чистом виде, либо в разведении 1:10. Аналогичным образом, результаты прямого ИФА показали низкую серореактивность со значением титра разведения <200 против белковой фракции сывороточного глобулина пангаса в качестве антигена . Дот-ИФА также был проведен для обнаружения присутствия специфических антител против Aeromonas hydrophila и Edwardsiella tarda в P. pangasius отдельно путем экспериментальной инокуляции. В обоих случаях наблюдалось развитие интенсивного цветного пятна, что в свою очередь указывало на специфичность иммуноконъюгата ASG-HRPO в обнаружении антител к A. hydrophila и E. tarda в сыворотке P. pangasius. Развитие цветного пятна при добавлении сенсибилизированной рыбьей иммунной сыворотки и инкубации предполагало, что иммуноконъюгат ASG-HRPO может быть использован для серомониторинга специфических антител и серодиагностики заболеваний, вызываемых E. tarda и A. hydrophila.