Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Не обнаружено потенциального риска развития рака для свободновирусных перепрограммированных стволовых клеток, полученных из дофаминергических нейронов фибробластов взрослых мышей

Лю Г.

Цель: Заместительная терапия стволовыми клетками посредством перепрограммирования соматических клеток является важной перспективной терапией для нейродегенеративных заболеваний и персонализированной медицины. Поскольку вирус-переносящие гены перепрограммирования создают значительный риск образования опухолей, современные подходы, как правило, заменяют вирусную модель невирусной системой. Однако все еще существует большая обеспокоенность относительно онкогенных свойств этих генов перепрограммирования. В настоящее время нет прямых доказательств того, что невирусные системы не влияют на интеграцию геномной ДНК и события мутагенеза в конечных продуктах после перепрограммирования.
Методы: Мы оценили потенциальный риск рака перепрограммированных дофаминергических нейронов, полученных из стволовых клеток, с помощью уникального невирусного вектора, содержащего четыре гена перепрограммирования. Перепрограммированные дофаминергические нейроны, полученные из стволовых клеток, были конечными продуктами после 50 дней культивирования клеток из фибробластов взрослых мышей. Через 6 месяцев культивирования эти клетки были оценены на предмет риска рака.
Результаты: Сначала были изучены общие оценки риска рака с использованием нескольких биомаркеров стволовых клеток. Мы не обнаружили никакой сверхэкспрессии этих биомаркеров. Более того, мы оценили, были ли выражены наиболее важные факторы нейротрансмиссии после 6 месяцев в массовой культуре клеток. Наши результаты определили, что была обнаружена только надежная экспрессия гена тирозингидроксилазы (TH), как фермента, ограничивающего скорость синтеза дофамина. Кроме того, конечный продукт TH-позитивных дофаминергических нейронов был подтвержден секвенированием геномной ДНК TH. Наши данные свидетельствуют о том, что ни один из четырех генов перепрограммирования не интегрировался в геномную ДНК клетки-хозяина и что никаких других событий мутагенеза не произошло после секвенирования геномной ДНК TH, связанной с полными 13 кодирующими экзонами с двухконечными частичными нетранслируемыми областями.
Заключение: Было доказано, что перепрограммированные дофаминергические нейроны, полученные из фибробластов взрослых мышей, являются безопасной технологией и подходом в качестве потенциальной терапии нейродегенеративных заболеваний.