Арав Амир, Шахар Абрахам, Зив-Полат Офра, Натан Йехудит и Патрицио Паскуале
Кусочки заднекорешковых ганглиев (DRG) и спинного мозга (SC) плодов крыс были витрифицированы в новой полуавтоматической системе витрификации, охлаждены в стерильном жидком воздухе (SLA) и сохранены в специальном стерильном герметичном контейнере в жидком азоте (LN). После нагревания органотипические стационарные культуры были получены с использованием NVR-Gel (состоящего в основном из гиалуроновой кислоты и ламинина) и обогащены нейрональными факторами, конъюгированными с наночастицами оксида железа. Оценка культур проводилась с помощью ежедневных наблюдений фазово-контрастной микроскопии и иммунофлуоресцентного окрашивания.
Результаты показали, что нейроны SC сохранили свою многополярную форму и восстановили дендриты и аксоны. Нейроны DRG округлой формы показали эухроматические ядра с выраженными ядрышками и активную регенерацию нервных отростков. Миграция как нейронов, так и плоских клеток (фибробластов и глиальных шванновских клеток) началась в течение 48 часов после посева и усилилась в последующие дни.
В заключение можно сказать, что использование полуавтоматической витрификации, стерильной витрификации и стерильного хранения нейрональных тканей из ЦНС и ПНС является успешной передовой технологией для сохранения нейронов и глиальных клеток, как показано в восстановлении полной регулярной модели роста в культуре. Это может быть важным шагом на пути к клиническому использованию при реконструкции тяжелых периферических нервов и травм спинного мозга.