Журнал тропических болезней и общественного здравоохранения

Абстрактный

Вложенная полимеразная цепная реакция (ПЦР) на фиксированных окрашенных предметных стеклах в сравнении с цельной кровью как источником ДНК на юго-востоке Ирана

Эбрагимзаде Адель, Мохаммади Саид и Полшекан Мир Али

Микроскопическое исследование толстых мазков крови (TBS) остается методом выбора для диагностики малярии у человека. В последнее время для обнаружения и идентификации паразитов малярии используются альтернативные диагностические методы, такие как вложенная ПЦР. Целью данного исследования было сравнение чувствительности и специфичности вложенной ПЦР, выполненной с использованием ДНК, выделенной из цельной крови, с фиксированными окрашенными предметными стеклами. Было проведено 125 исследований крови, включая 76 (60,8%) мужских и 49 (40,2%) женских образцов. Процент паразитемии в положительных образцах рассчитывался из общего количества 200 лейкоцитов, подсчитанных в тонких мазках крови, окрашенных по Гимзе. Анализ вложенной ПЦР проводился на образцах, выделенных ДНК, с помощью специфических праймеров для амплификации гена плазмодия 18ssr РНК. Из всех 125 образцов крови 50 (40%) были положительными (41 (32,8%) P. vivax, 9 (7,2%) P. falciparum) и 75 (60%) были отрицательными на наличие малярийных паразитов при микроскопическом исследовании. Вложенная ПЦР на образцах цельной крови выявила 66 (52,8%) видов плазмодиев: 47 (37,6%) P. vivax, 13 (10,4%) P. falciparum, 6 (4,8%) смешанных инфекций P. vivax и P. falciparum. Вложенная ПЦР на предметных стеклах периферической крови выявила 49 (39,2%) видов плазмодиев: 34 (27,2%) P. vivax, 10 (8%) P. falciparum, 5 (4%) смешанных инфекций P. vivax и P. falciparum. Исследование показало, что чувствительность и специфичность вложенной ПЦР составляли 96% и 76% соответственно, когда целевая ДНК была извлечена из крови, и 78% и 86% при получении ДНК из мазков. Эти исследования продемонстрировали, что ДНК плазмодия может быть успешно выделена из TBS, что указывает на то, что этот метод сохранения ДНК можно считать адекватным и удобным для эпидемиологических исследований.