Генная технология

Абстрактный

Мутационный анализ гена FOG2 у пациентов с врожденным пороком сердца

Бринда Элангован

Врожденный порок сердца (ВПС) является одним из типов дефектов развития с высоким уровнем заболеваемости у младенцев. Сообщается, что фактор транскрипции GATA, связывающий фактор 4 (GATA4), играет важную роль в эмбриогенезе и развитии сердца. Целью исследования является оценка мутационного анализа гена FOG2 при врожденном пороке сердца. Мы выбрали FOG2 для идентификации редких вариаций у пациентов с ВПС из индийской популяции. Для оценки исследования мы провели ПЦР-амплификацию для экзона 7 и экзона 8, поскольку большинство доменов цинковых пальцев FOG2 локализованы в этих двух экзонах. Экзон 8 был разделен на 5 различных областей, т. е. экзон 8A-8E, поскольку он имеет длинную кодирующую область. Эти экзоны были амплифицированы в различных условиях. Например, экзоны 8A-B и E были амплифицированы с помощью ДНК-полимеразы Platinum taq без необходимости использования каких-либо усилителей ПЦР, таких как ДМСО (диметилсульфооксид) или бетаин. Однако экзон 8C был амплифицирован в присутствии ДМСО. Температура отжига для каждого экзона различна. Экзон 7 амплифицирован ДНК-полимеразой Taq. Специфичность и количество амплифицированных продуктов проверяются с помощью лестницы ДНК 100bp.