Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Эмбриональные фибробласты мыши приобретают потенциал саркомогенеза после дифференциации в клетки, продуцирующие инсулин

Гупта А., Куртович С., Нг Т.Т., Цуёши Т., Нарвани К., Бьянкотти Дж.К., Спурка Л., Фунари В., Бальцер Б., Талавера-Адаме Д. и Дефо Д.С.

Обильный источник инсулин-продуцирующих клеток повысит успешность трансплантации островков для лечения диабета. Инсулин-продуцирующие клетки могут быть получены из человеческих фибробластов, которые приобрели фенотип мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Однако эти МСК способны давать начало саркомам после трансформации. Нашей целью было исследовать, приобретают ли мышиные эмбриональные фибробласты (МЭФ) потенциал саркомогенеза после дифференциации в инсулин-продуцирующие клетки. Мы получили инсулин-продуцирующие клетки из линии МЭФ MMMbz. После дифференциации клетки были помечены зеленым флуоресцентным белком (GFP), управляемым крысиным инсулиновым промотором (INS-GFP) для выделения клеток, их расширения и характеристики с помощью иммуноцитохимии (ICC), количественной ОТ-ПЦР (qRT-PCR) и генетических микрочипов. Затем эти клетки были отсортированы FACS и трансплантированы под почечную капсулу мышей SCID для оценки поведения клеток. Трансплантированные клетки были проанализированы с помощью IHC. MMMbz экспрессировал рецептор тромбоцитарного фактора роста альфа (PDGFR-α) и нестин. После дифференциации в отсортированных клетках была обнаружена более высокая экспрессия маркеров бета-клеток по сравнению с неотсортированными клетками. Генетический микрочип подтвердил экспрессию маркеров поджелудочной железы и мезенхимы вместе с активацией раковых путей. В течение 30 дней после трансплантации у всех пересаженных мышей развились недифференцированные саркомы, которые нарушили дальнейшую оценку функции инсулинпродуцирующих клеток. Таким образом, инсулинпродуцирующие клеточные линии могут быть получены in vitro из мышиных эмбриональных фибробластов, которые ведут себя как МСК, но потенциал саркомогенеза может быть предоставлен субпопуляцией трансформированных клеток.