Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Моноцитарно-макрофагальная клеточная дифференцировка, вызванная TPA в клетках HL60, приводит к потере ацетилирования лизина 16 гистона H4

Рахул Кумар Вемпати

12-O-тетрадеканоилфорбол-13-ацетат (TPA) представляет собой форболовый эфир и индуцирует дифференциацию клеток типа моноцитов/макрофагов в клетках HL60. Уровни и паттерны экспрессии генов значительно различаются между дифференцированными и недифференцированными клетками HL60. Эпигенетические модификации гистонов играют решающую роль в активации транскрипции, а изменения уровней модификаций значительно влияют на паттерн экспрессии генов. Ацетилирование гистона H4 лизина 16 (H4K16ac) является одной из таких модификаций и играет важную роль в активации транскрипции. Изменения в его уровне ацетилирования, вызванные как физиологическим, так и патологическим эффектом, будут иметь драматическое влияние на экспрессию клеточных генов. В данном исследовании было проведено исследование, чтобы увидеть влияние дифференциации, вызванной TPA, на уровни H4K16ac в клетках HL60. Результаты, полученные с помощью проточного цитометрического анализа, показали экспрессию маркера поверхности макрофагальных клеток CD11b на дифференцированных TPA клетках HL60, а вестерн-блоты выявили резкое снижение регуляции H4K16ac в дифференцированных клетках. Иммуноблоттинг и коиммунопреципитационный анализ выявили зависящее от повреждения ДНК усиление ацетилирования H4K16 и его совместную локализацию с γH2AX в недифференцированных клетках. В то время как дифференцированные TPA клетки (CD11B+ve) не показали никакого такого повышения уровней ацетилирования H4K16 при наличии повреждения ДНК. Настоящее исследование показывает, что вызванная TPA дифференциация клеток HL60 в макрофаги приводит к снижению регуляции ацетилирования H4K16.