Журнал биомолекулярных исследований и терапии

Абстрактный

Молекулярная характеристика очищенного фермента бактериальной целлюлазы, иммобилизованного в магнитной наночастице

Пурани Тирувенгадасами Раджендран, Велманикандан Баласубраманиан, Венуприя Веллингири, Рагави Равичандран, Дхивья Дхаршини Удхая Кумар, Понмани Варуна Рамакришнан

Предыстория: Растения были богаты лигноцеллюлозой и целлюлозным содержимым, которое образует очень сложную структуру, и это требует эффективной ферментативной катализирующей реакции для разработки полезного продукта. Различные отрасли промышленности, такие как текстильная, бумажная, сельское хозяйство и биотопливо, нуждаются в ферментативной обработке (целлюлазе), которая стоит до 40% от общей себестоимости производства, чтобы преобразовать в полезный продукт.

Методы: Чтобы получить лучшее из этой экономической непредвиденной ситуации, стоимость целлюлазы была снижена путем иммобилизации с помощью магнитных наночастиц (МНЧ). Предполагается, что иммобилизация фермента целлюлозы с помощью магнитных наночастиц может соответствовать экономически целесообразному производству целлюлазы. Настоящее исследование описывает молекулярную характеристику целлюлазы, выделенной из целлюлолитических бактерий, и ее параметры роста были оптимизированы для производства ее фермента. Были выбраны целлюлолитические бактерии с эффективным свойством гидролиза субстрата, и была оценена ее целлюлазная активность. Кинетика целлюлазы была рассчитана с использованием кинетики Михаэлиса-Ментена (кинетика ММ) для нахождения V _max и K _m .

Результаты: Очищенная целлюлаза была иммобилизована с помощью магнитной наночастицы, ее эффективность и выход были рассчитаны и охарактеризованы с помощью FTIR, SEM и XRD. Пептидный массовый отпечаток целлюлазы был оценен с помощью анализа MALDI-TOF-TOF. Свободный фермент и иммобилизованный фермент были проверены на его температурную оптимизацию и стабильность, оптимизацию и стабильность pH, субстратную специфичность, стабильность хранения. Также была оценена возможность повторного использования иммобилизованного фермента.

Заключение: В будущем ферментативно и молекулярно охарактеризованный ген целлюлазы из целлюлолитических бактерий будет сверхэкспрессироваться в E.coli , чтобы сделать стоимость целлюлазы приемлемой.