Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Мыши с дефицитом ГТФазы Rap1A демонстрируют сниженную адгезию гемопоэтических и мезенхимальных стромальных клеток, но сохраняют потенциал репопуляции гемопоэтических клеток

Эрика Флек, Стефан Геттиг, Харальд Кропшофер, Юлиана Штайнманн, Аннет Дорн, Бриджит Рюстер, Эрхард Зайфрид, Юрген Шееле и Райнхард Хеншлер

Предыстория: Гуанинтрифосфатаза (ГТФаза) Rap1A участвует в пролиферации и миграции клеток в различных тканях. Однако ее роль в производстве, адгезии и миграции гемопоэтических клеток, полученных из костного мозга, до конца не изучена. Методы: Мы проанализировали мышей, у которых отсутствовал один или оба аллеля Rap1A, и измерили их адгезионную функцию и способность к гемопоэтическому репопуляции с помощью конкурентной трансплантации костного мозга в модели трансплантации CD45.1/CD45.2. Мы также использовали проточную цитометрию и анализ адгезии в проточной камере, зависящий от напряжения сдвига, для фенотипической характеристики и анализа адгезионных функций. Результаты: У мышей Rap1A-/- наблюдалось снижение количества лимфоцитов и предшественников, формирующих гемопоэтические колонии, в крови, в то время как количество гранулоцитов, моноцитов или тромбоцитов существенно не изменилось по сравнению с контрольной группой. Индуцированная хемокином CXCL12 адгезия клеток костного мозга с истощенными маркерами линии (Lin-) к молекуле адгезии сосудистых клеток (VCAM)-1 и к молекуле межклеточной адгезии (ICAM)-1 была значительно снижена у мышей Rap1A-/-. Однако конкурентная репопуляция клеток костного мозга с дефицитом Rap1A не уступала костному мозгу дикого типа через 9 месяцев после трансплантации. Не наблюдалось разрастания мезенхимальных стромальных клеток (МСК) из костного мозга мышей Rap1A-/-, тогда как МСК Rap1A+/- демонстрировали сниженную экспрессию молекул адгезии, участвующих в хоуминге предшественников, и нарушенную адгезию к первичным эндотелиальным клеткам и VCAM-1 под действием напряжения сдвига in vitro по сравнению с их аналогами дикого типа. Выводы: Rap1A регулирует адгезию незрелых кроветворных клеток и мезенхимальных стромальных клеток, но, по-видимому, является избыточным для приживления кроветворных клеток.