Ноа Мадар-Балакирски, Ури Арад, Шарон Амир, Михал Мандельбойм, Элла Мендельсон, Дэн Каспи и Ори Элькаям
Цель: Мониторинг иммунных реакций необходим при лечении иммуносупрессированных лиц, включая ревматических пациентов. Оценка клеточного иммунитета необходима для подтверждения функций эффекторных клеток, специфичных для вируса, но она плохо стандартизирована и страдает от технических ограничений и неточных результатов. Поэтому существует потребность в надежных методах оценки клеточного иммунитета. В этом исследовании мы сравнили клеточный иммунный ответ на вакцину против гриппа у популяции пациентов с ревматоидным артритом (РА) и здоровых субъектов тремя методами.
Методы: Трехвалентная субъединичная вакцина против гриппа была введена 18 пациентам с РА, которые принимали противоревматические препараты, модифицирующие течение заболевания, и 18 здоровым контрольным лицам. Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и сыворотка были получены непосредственно перед вакцинацией и примерно через 28 дней после нее. Клеточно-опосредованные иммунные ответы на вакцинацию оценивались с помощью (1) проточного цитометрического анализа продукции IL-2/IFN-γ в активированных CD4/CD8 T-клетках, (2) иммуноферментного анализа для анализа секреции IFN-γ и (3) анализа активности гранзима B. Гуморальный ответ оценивался с помощью анализа торможения гемагглютинации.
Результаты: Вакцинация вызвала значительное увеличение секреции IFN-γ PBMC и активности гранзима B у пациентов с РА. Активность гранзима B также значительно увеличилась в контрольной группе, но не было никаких изменений в уровнях секретируемого IFN-γ. Никаких групповых различий в частотах IFN-γ/IL-2-продуцирующих активированных CD4/CD8 T-клеток не наблюдалось с помощью проточной цитометрии. Геометрическое среднее титров антител ингибиции гемагглютинации значительно увеличилось для штаммов гриппа H1N1/H3N2 в обеих группах.
Выводы: Анализ активности гранзима B был единственным методом, позволяющим обнаружить значительный клеточно-опосредованный иммунный ответ в обеих группах, тогда как значительное увеличение секреции IFN-γ было продемонстрировано только у пациентов с РА. Анализ методом проточной цитометрии не выявил продукцию IL-2 и IFN-γ в обеих группах. Доступные в настоящее время методы измерения клеточной чувствительности к вакцинации против гриппа непоследовательны и ограничены в своей способности отражать приобретенный клеточный иммунитет.