Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Длительное существование стволовых клеток, полученных из жировой ткани донора, в организме реципиента может влиять на выживаемость васкуляризированной композитной ткани после аллотрансплантации в модели грызунов

Чиен-Чан Чен, Сигэру Гото, Цзя-Чун Цай и Юр-Рен Куо

Наши предыдущие исследования продемонстрировали, что донорские стволовые клетки, полученные из жировой ткани (ASC), в сочетании с краткосрочной иммунодепрессивной терапией могут продлить выживаемость васкуляризированной композитной аллотрансплантации тканей (VCA) в модели задних конечностей грызунов. В этом исследовании мы исследовали, могут ли хоуминг и миграция донорских ASC модулировать выживаемость VCA. Были выполнены ортотопические трансплантации задних конечностей от самцов Wistar крысам Lewis (день 0). Донорские ASC были размножены из жировой ткани и субкультуры, полученной от трансгенных по зеленому флуоресцентному белку (GFP) крыс Wistar. Трансплантированная крыса (GFP-отрицательная Льюис) получила иммуносупрессивный протокол, аналогичный нашему предыдущему дизайну, включая краткосрочный циклоспорин-А (CsA, дни 0-+20), антилимфоцитарную сыворотку (ALS; 0,5 мл внутрибрюшинно; -4, +1) и три раунда GFP+-ASC (2 × 106 клеток/время, внутривенно в дни +1, +7 и +21). Оценка приживления различных тканей донора и реципиента проводилась с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания. Проточная цитометрия проводилась для количественной оценки GFP+-ASC. Результаты показали, что выживаемость аллотрансплантата была значительно продлена (>100 дней) исключительно в группе ASC-ALS-CsA, что хорошо коррелировало с долгосрочным существованием донорских GFP-положительных ASC у реципиента. Анализ проточной цитометрии также выявил очевидную экспрессию GFP+-ASC в периферической крови реципиента через 2 недели после инфузии ASC, но перекос в снижении после трансплантации. Иммунофлуоресцентное окрашивание, проведенное на образцах биопсии тканей, показало, что положительные по GFP клетки присутствовали в аллоскинине и коже реципиента, а также в паренхиматозных тканях печени и селезенки через 2 недели после инъекции ASC. Однако никакой очевидной экспрессии GFP+-ASC не было обнаружено в тканях реципиента через 16 недель после трансплантации, за исключением паренхимы селезенки реципиента. Это показало, что донорские ASC долгосрочно существовали в ткани селезенки реципиента, а циркулирующая кровь может привести к продлению выживаемости аллотрансплантата.