Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Крупномасштабное клиническое размножение мезенхимальных стволовых клеток в закрытой автоматизированной системе размножения клеток Quantum®, соответствующей требованиям GMP: сравнение с размножением в традиционных Т-образных флаконах

Шанталь Лешантер, Стефано Байла, Мишель Этьен Янссенс, Оливье Жье, Александра Брике, Этьен Боду и Ив Беген

Цели: Значительные успехи были достигнуты в отношении знаний об иммунорегуляторных свойствах мезенхимальных стволовых клеток (МСК). В настоящее время мы участвуем в нескольких клинических протоколах, оценивая эти свойства в различных условиях, включая трансплантацию гемопоэтических клеток или солидных органов, а также тяжелые или рефрактерные аутоиммунные расстройства. Учитывая большое количество ex-vivo расширенных клеток, необходимых для этих клинических протоколов (доза МСК варьируется от 1 до 4x10-6 МСК/кг пациента на инфузию), мы оценили устройство Quantum®, соответствующую требованиям GMP, функционально закрытую, автоматизированную систему биореактора с полыми волокнами, и сравнили ее с нашей традиционной клинической системой культивирования во флаконах. Методы: Первичное и предварительно обогащенное расширение МСК одновременно проводилось в обеих системах культивирования и оценивалось с точки зрения скорости расширения и соответствия спецификациям качества и критериям выпуска ISCT. Из практических соображений в большинстве экспериментов, проведенных в биореакторе (расширения P1 и P2), использовались размороженные МСК. Их сравнивали как со свежими, так и с размороженными экспансиями МСК в колбах. Результаты: Устройство Quantum® воспроизводимо производило терапевтические дозы МСК, которые соответствуют критериям выпуска ISCT, стерильны, лишены микоплазмы и эндотоксина, имеют нормальный кариотип и демонстрируют иммуносупрессивные и дифференцировочные способности in vitro. Клетки также росли быстрее в биореакторе, чем в колбах во время пассажа P1 (время удвоения 40 по сравнению с 56 часами в колбах) и экспансий P2, но не во время первичной фазы экспансии (P0). Посев 20x10-6 размороженных предварительно отобранных клеток P2 на устройство позволил нам собрать 110-276x10-6 МСК после 7-дневного расширения; посев 50x10-6 клеток привел к сбору 291-334x10-6 МСК. Заключение: В заключение следует сказать, что устройство Quantum® является превосходной системой для получения клинической дозы МСК, но экономическая эффективность варьируется в зависимости от применяемой стратегии производства. В нашей конкретной ситуации использование устройства Quantum не привело к решению, позволяющему сэкономить средства.