Биология и медицина

Абстрактный

Выделение новой популяции мультипотентных стволовых клеток из эпидермального слоя кожи человека

А.Б. Баладжи, Кайзер Джамиль, Дж. Марутирам и К.М. Хабибулла

Образцы передней кожи были собраны после хирургического иссечения у мальчиков младше 7 лет из Медицинского колледжа Декан – Хайдарабад, в холодном физиологическом растворе (40 C) в стерильных контейнерах. Эти образцы кожи были разрезаны на небольшие кусочки и инкубированы в трипсинизированном фосфатном буферном растворе (PBS) в течение ночи для отделения эпидермиса от дермы. Отделившийся эпидермальный слой был поднят и взят для приготовления клеточной суспензии. Жизнеспособность клеток составила 88% при окрашивании PI. Около 50 мкл клеточной суспензии было аликвотировано во флаконы (105 клеток/на флакон) и инкубировано с 2 мкл антител. Были использованы различные биомаркеры стволовых клеток, такие как CD34 – один из маркеров стволовых клеток кожи, CD 49f и CD29 – общие маркеры стволовых клеток, лимфоцитарный маркер CD45, маркер стволовых клеток кожи CD90 (Thy-1), эндотелиальный маркер CD105 и нейральный адгезивный маркер CD56 (NCAM). С использованием этих маркеров клеточной поверхности стволовых клеток была проведена цитометрия на FACS Calibur с сортировщиком (BD Biosciences). Эти иммунофенотипические маркеры с программным обеспечением Cellquest выразили характеристики стволовых клеток. Анализы FACS дали различные профили стволовых клеток/предшественников мезенхимальных, гемопоэтических и нейральных предшественников. Эти выраженные профили указали на то, что его предшественник может иметь мультипотентный и/или плюрипотентный характер. Используя эмбриональные маркеры, мы могли бы выбрать популяцию стволовых клеток, чтобы получить мультипотентные или плюрипотентные клетки, которые могли бы иметь способность регенерировать клетки кожи для применения в случаях ожогов, ран, глубоких ожогов и незаживающих ран. В заключение мы впервые представляем здесь выделение плюрипотентных / мультипотентных стволовых клеток кожи из образцов биопсии крайней плоти человека и их потенциальное применение для различных целей.