Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Выделение и характеристика стволовых клеток взрослого межпозвоночного диска из здоровых тканей межпозвоночного диска человека

Кристофер Данч, Эрика Диллард и Умар Акбар

В этом отчете подробно описывается изоляция, культивирование и характеристика стволовых клеток позвоночного диска, полученных из образцов ткани позвоночного диска взрослого человека. Используя методы культивирования суспензии стволовых клеток и биологию, стволовые клетки позвоночного диска взрослого человека были изолированы и моноклонально культивированы в многоклеточные сфероподобные кластеры (дискосферы). Дискосферы из первой серии культур были собраны, обработаны и пересажены как отдельные стволовые клетки для серийных исследований расширения с использованием суспензионной культуры, что показало возможность линейного расширения. Дискосферы и стволовые клетки позвоночного диска взрослого человека были высеяны на покрытые матрицей культуральные поверхности в среде стволовых клеток на несколько часов для обеспечения фиксации и исследованы на биомаркеры стволовых клеток. Дискосферы и стволовые клетки позвоночного диска взрослого человека были высеяны на покрытые ламинином культуральные поверхности в хондрогенной среде и условиях культивирования на 14 дней для дифференциации их в клетки NP. Клетки NP, культивированные в этих экспериментах, продемонстрировали морфологию и фенотип NP; экспрессию биомаркеров NP, секрецию внеклеточного матрикса и способность к серийному пассированию с возможным расширением большого объема. Исследования тканевой инженерии с использованием «взрывного кинетического анализа» продемонстрировали, что дискосферы обладают замечательной внутренней биологией развития и тканевой инженерии, которая является надежной и организованной. Подводя итог, можно сказать, что взрослые дисковые стволовые клетки и клетки NP были выделены, культивированы и охарактеризованы из здоровых тканей спинномозгового диска. Эти результаты демонстрируют важный потенциал, который необходимо изучить для использования тканевой инженерии на основе стволовых клеток для лечения дегенеративного заболевания межпозвоночных дисков (DDD).