Биология и медицина

Абстрактный

Исследование неинвазивных образцов мочи с молекулярными флуктуациями на наличие вирусов папилломы человека высокого риска как воспалительного кофактора при раке предстательной железы

Анита Огнянова Кавракова, Биляна Георгиева, Камен Аначков, Красимир Янев, Георгий Иванов, Ванио Митев и Албена Тодорова

Предыстория: Целью исследования является неинвазивное исследование образцов мочи у пациентов с подозрением на рак предстательной железы (РПЖ) с помощью панели слияний PCA3, TMPRSS2-ERG и гиперметилирования промотора GSTP1. Кроме того, мы проверили образцы мочи на наличие вирусов папилломы человека (ВПЧ) высокого риска как воспалительного кофактора в сложном происхождении рака предстательной железы (РПЖ). Методы: Было проанализировано в общей сложности 50 пациентов с повышенным уровнем ПСА и/или физиологическими симптомами РПЖ. Выделение РНК и ДНК; Обратная транскрипция; ПЦР в реальном времени; Секвенирование ДНК; Бисульфитная конверсия ДНК; Метилспецифическая ПЦР; Применялись цитологические препараты и окрашивание. Результаты: У большинства пациентов были зарегистрированы молекулярные колебания: неопластический аллель GSTP1, сильно повышенная экспрессия или гиперэкспрессия PCA3. Только в 4 случаях был выявлен положительный статус TMPRSS2-ERG. Типы ВПЧ высокого риска были обнаружены примерно в 35% наших образцов мочи, полученных от пациентов с высоким риском РПЖ на основе их молекулярных профилей. Примерно 96% обнаруженных ВПЧ высокого риска: 16, 33, 35, 31, распределены в подгруппе с самым высоким онкогенным потенциалом. Оценочная частота типов ВПЧ высокого риска в контрольных мужских образцах с уротелиальной инфекцией значительно ниже (11%). Патологическое исследование цитологических слайдов из образцов мочи с высоким риском ВПЧ показало воспаление; переменные адаптации клеточного роста и дифференцировки и частично вирусный цитопатический эффект. У части пациентов с молекулярным РПЖ были обнаружены нарушенные профили предраковых состояний (увеличение примитивных клеток с нарушенным созреванием; увеличенное гиперхромное ядро ​​и конденсированный хроматин). Заключение: Наши молекулярные выводы по РПЖ были подтверждены на клеточном уровне цитологическими данными о высоких степенях изменений: грубо распределенная текстура хроматина с нерегулярностью и утолщением ядерной мембраны; высокое соотношение N:C; выраженность ядрышек и нерегулярность их формы; идентичные монотонные ядрышки, присутствующие во всех клетках в группе (т. е. «клональный» паттерн); опухолевый диатез. Настоящее исследование касается новых данных по болгарским пациентам с РПЖ.