Такахиро Накамура, Томохико Казама, Юки Нагаока, Ясудзи Инамо, Хидео Мугисима, Сёри Такахаши и Таро Мацумото
Введение: Стволовые/стромальные клетки, полученные из жировой ткани (ASC), считаются перспективным источником клеток для терапевтического ангиогенеза, поскольку клетки могут быть получены с помощью минимально инвазивной процедуры и поскольку они секретируют различные ангиогенные цитокины. В настоящем исследовании было изучено влияние возраста донора и количества пассажей на ангиогенную активность кондиционированной ASC среды (ASC-CM).
Методы: Человеческие ASC (возраст донора от 5 месяцев до 82 лет; n = 10) культивировались, и ASC-CM собирались на пассажах 2, 4 и 6. Ангиогенная активность ASC-CM оценивалась с помощью анализа образования трубок с использованием системы, в которой человеческие эндотелиальные клетки пупочной вены (HUVEC) и фибробласты совместно культивировались. Концентрации сосудистого эндотелиального фактора роста-A (VEGF-A) и фактора роста гепатоцитов (HGF) в каждой ASC-CM измерялись с помощью иммуноферментного анализа.
Результаты: Возраст донора более 60 лет повлиял на пролиферативную способность ASC на 4-м пассаже и позже. ASCCM значительно усилил образование трубок HUVEC, и этот ответ не зависел от возраста донора. ASC-CM на 6-м пассаже показал более низкую способность к образованию трубок по сравнению с ASC-CM на 4-м пассаже, хотя эта способность все еще была эквивалентна положительному контролю (среда, содержащая 10 нг/мл VEGF-A). Возраст донора более 26 лет повлиял на уровень VEGF-A, но не на уровень HGF в ASC-CM, хотя мы не обнаружили прямой корреляции между уровнями VEGF-A/HGF и способностью к образованию трубок.
Заключение: Наши результаты демонстрируют зависящее от количества пассажей, но независимое от возраста донора снижение ангиогенной активности ASC-CM.