Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

In Vitro поддерживаемая дифференцировка эпителиальных стволовых клеток толстой кишки крысы

Марва М. Абу-Сери, Маха А. Эль-Демеллави, Мохамед Эль-Сайед и Фатма Эль-Рашиди

Эпителий толстой кишки состоит из различных типов клеток, включая абсорбционные, экспрессирующие щелочной фосфат, бокаловидные, секретирующие слизь и нейроэндокринные клетки, которые происходят из стволовых клеток посредством асимметричного деления. Непрерывное обновление стволовых клеток происходит в условиях высококоординированного окислительно-восстановительного состояния клеток. В текущем исследовании, основанном на сравнении с другими культуральными средами, эпителиальные клетки толстой кишки смогли поддерживаться in vitro с нормальным статусом более двух месяцев при выбранных условиях культивирования; среда α-MEM, содержащая 20% фетальной бычьей сыворотки. Культивируемые эпителиальные клетки имели нормальное время удвоения и нормальные морфологические характеристики, исследованные с помощью трансмиссионного электронного микроскопа. Кроме того, эти культивируемые клетки содержали функциональные стволовые клетки и сохраняли свою дифференцировочную способность стволовых клеток толстой кишки по сравнению со свежеизолированными эпителиальными клетками слизистой оболочки, о чем свидетельствует сохранение экспрессии альдегиддегидрогеназы 1B1 (от 11,31 ± 0,45 до 11,15 ± 0,48), способности восстанавливать нитрат серебра, щелочной фосфатной активности (от 0,513 ± 0,007 мЕ/мкг до 0,438 ± 0,005 мЕ/мкг), секреции муцина (от 34,71 ± 0,714 мкг/мл до 32,93 ± 0,357 мкг/мл) при соответствующем уровне окислительно-восстановительного состояния клеток (от -258,4 ± 1,3 мВ до -237,4 ± 3,7 мВ). Настоящее исследование показало сохранение потенциала репликации и функциональной дифференциации популяции эпителиальных стволовых клеток толстой кишки в этой культуре. Вышеуказанная система культивирования может быть полезна в качестве модели in vitro для исследований стволовости, токсикологии и канцерогенеза.