Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Характеристика in vitro молекулярных механизмов, регулирующих ангиогенез мезенхимальных стволовых клеток пуповинной крови: шаг к терапии мультипотентными стволовыми клетками для регенерации сосудов

Сантьяго Роура, Хули Р. Баго, Каролина Гальвес-Монтон, Херонимо Бланко и Антони Байес-Генис

Мезенхимальные стволовые клетки (МСК ), полученные из пуповинной крови (ПБК) , способствуют росту сосудов in vivo. Здесь мы исследовали внутриклеточный регуляторный механизм, участвующий в ангиогенном поведении UCBMSC in vitro. Ангиогенная активность измерялась в стандартном анализе культуры на основе Матригеля после обработки клеток известными модуляторами раннего фактора ответа роста (Egr-3) и ангиогенеза эндотелиальных клеток (EC). Экспрессия Egr-3 оценивалась с помощью количественной ОТ-ПЦР и непрямой иммунофлуоресценции и, в частности, отменялась с помощью технологии малых интерферирующих РНК (siRNA). В то время как добавление форбол-12-миристат-13-ацетата (PMA) способствовало ангиогенной способности (P < 0,001), селективные ингибиторы PKC/MAPK/ERK отменяли эту способность (P = 0,016) в UCBMSC. Лечение PMA увеличило уровни мРНК и белка Egr-3 (P < 0,001). Однако циклоспорин А (CsA) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) не повлияли ни на уровни Egr-3, ни на формирование полигональных клеточных сетей. PMA также индуцировал фосфорилирование ERK1/2 , которое было отменено селективным ингибитором U0126 (P = 0,021 и P = 0,014 соответственно). Выраженное ингибирование способности к формированию сетей наблюдалось в клетках, трансдуцированных siEgr-3 (P < 0,001). В совокупности наши результаты подчеркивают, что Egr-3 обычно участвует в молекулярном механизме, регулирующем зрелый EC и мультипотентный ангиогенез MSC. Эти знания могут быть применены для повышения терапевтической эффективности против сосудистых заболеваний человека.