Том Х. Джин, Тианли Ку, Анант Райна, Питер Александр и Эрик Цао
Вакцины Bacillus Calmette–Guérin (BCG) и рекомбинантные вакцины BCG (rBCG) можно генетически проследить до живого ослабленного штамма Mycobacterium bovis. Поскольку жизнеспособность организма имеет важное значение для стимуляции защитного иммунного ответа, мониторинг количества жизнеспособных организмов является неотъемлемой частью контроля качества вакцин. Тест на колониеобразующие единицы (КОЕ) был общепринятым анализом для определения жизнеспособности БЦЖ и является широко принятым суррогатом эффективности БЦЖ. Однако анализ КОЕ проблематичен и требует много времени. Медлительность и высокая изменчивость результатов теста КОЕ являются основными движущими силами для производителей и контрольных лабораторий в поиске быстрого, более воспроизводимого альтернативного анализа подсчета жизнеспособных микроорганизмов. Модифицированный анализ люминесценции аденозинтрифосфата (АТФ) был разработан Statens Serum Institut и был предложен ВОЗ в качестве альтернативного анализа подсчета жизнеспособных микроорганизмов. Однако определенные условия в процессе подготовки образцов и экстракции АТФ должны быть установлены до того, как анализ АТФ сможет соответствовать требованиям надежности и воспроизводимости. Это исследование сосредоточено на определении условий, необходимых для надежного процесса анализа АТФ для препаратов БЦЖ/рБЦЖ. Используя наш улучшенный протокол анализа АТФ, мы продемонстрировали, что коэффициент корреляции между количеством КОЕ и концентрацией АТФ вакцин БЦЖ/рБЦЖ был высоким (R2=0,83 для образцов ускоренной стабильности и R2>0,97 для всех других препаратов). Анализ люминесценции АТФ является быстрым, чувствительным, надежным, неспецифичным к штамму методом количественной оценки жизнеспособности живых аттенуированных микобактериальных вакцинных препаратов.