Современная химия и приложения

Абстрактный

Улучшения в высокоэффективной жидкостной хроматографии и условиях экстракции для анализа окисленных жирных кислот с использованием спин-колонки смешанного режима

Такао Санаки, Такудзи Фудзихара, Ре Ивамото, Такеши Ёсиока*, Кеничи Хигасино, Тору Накано и Ёсито Нумата

Липидомика с помощью жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии использовалась для лучшего понимания роли окисленных жирных кислот в развитии различных заболеваний. Однако требуется дальнейшая работа по улучшению процесса подготовки образцов и размывания пика цистеинил-лейкотриенов. В этом исследовании мы оценили различные подвижные фазы и условия экстракции. Добавление фосфорной кислоты в подвижную фазу улучшило размывание пика цистеинил-лейкотриенов. Условия экстракции также были оптимизированы с помощью спин-колонки, обладающей свойствами анионообмена и обращенной фазы. Эффективность экстракции модифицированной системы экстракции была исследована с использованием 62 липидов, и 13 дейтерированных липидов были исследованы для оценки эффектов матрицы и восстановления из образцов гомогената легких мышей. Эффективность экстракции ≥70% была получена почти для всех липидов. Хорошие результаты со стандартным отклонением <15% были получены для эффектов матрицы и восстановления. Наконец, эффективность нашего метода экстракции была сравнена с эффективностью нескольких традиционных методов, и эффективность лейкотриена C4 была значительно улучшена с использованием нашего метода. Более того, доля дисперсии между нашим методом и традиционными методами составила >0,99 для всех протестированных липидов. Таким образом, этот недавно разработанный метод представляет собой мощный инструмент для анализа липидов.