Журнал микробных и биохимических технологий

Абстрактный

Улучшенные анализы для определения действия антибиотиков на планктонные и сессильные бактерии на примере 1,8-цинеола

Броцманн В., Шуерман М., Кальчмидт Б., Кальчмидт С. и Судхофф Х.

Скрининг антибиотических веществ является обязательным рабочим этапом при разработке лекарств. Существует множество методов для проверки их эффективности, их можно разделить на методы диффузии и разбавления. Методы диффузии в агаровых средах являются скорее качественными подходами, тогда как методы разбавления, обычно выполняемые в полистирольных микротитровальных планшетах, часто используются для определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) и минимальной ингибирующей концентрации биопленки (МБИК50) количественным способом. Во время этих стандартизированных анализов физические свойства агента, например, его гидрофобные свойства и термическая нестабильность, часто игнорируются. В этом исследовании сравниваются различные диффузионные анализы по их чувствительности и улучшенные анализы разбавления в отношении термической чувствительности и гидрофобного характера антибиотиков. Мы применили 1,8-цинеол, гидрофобный антибактериальный компонент эфирных масел, к патогену Staphylococcus aureus и исследовали влияние времени инкубации, сосудов для культивирования клеток и обычно используемых поверхностно-активных веществ на анализ. Представленное исследование описывает оптимизированный диффузионный анализ и протокол для точного определения МИК и МБИК50 термостабильных гидрофобных антибиотических веществ. Наши анализы могут быть легко выполнены, поскольку они основаны на измерениях оптической плотности и простом окрашивании кристаллическим фиолетовым. Мы приходим к выводу, что предварительные скрининги гидрофобных веществ могут быть выполнены методом хорошей диффузии. Однако для определения МИК и МБИК50 мы настоятельно рекомендуем использовать очищенные и протравленные стеклянные пробирки вместо полистирольных планшетов для культивирования клеток. Использование поверхностно-активных веществ Твин 80 или Твин 20 было признано ненужным и, кроме того, фальсифицирующим результаты. В совокупности наши улучшенные стандартные методы могут помочь лучше количественно оценить антимикробный потенциал гидрофобных антибиотиков, например, эфирных масел. Это может дать новое представление о способе действия и, кроме того, позволить разработать новые антимикробные вещества, срочно необходимые для борьбы с резистентностью к распространенным антибиотикам.