Журнал биомолекулярных исследований и терапии

Абстрактный

Иммунохимическая характеристика специфической последовательности белка URG7

Остуни А, Кувьелло Ф, Сальвия А.М., Д'Аурия Ф, Статуто Т, Ди Нардок Э, Мильонико Р, Карреттад В, Мусто П и Бисачча Ф

URG7 — это антиапоптотический белок, состоящий из 99 аминокислотных остатков, которые активируются антигеном x во время инфекции HBV. Первые 74 аминокислоты идентичны остаткам белка множественной лекарственной устойчивости 6 (MRP6), в то время как аминокислотные остатки с 75 по 99 специфичны для белка URG7. Для идентификации антигенных свойств этой последовательности URG7 были проведены иммуноинформационные инструменты и анализ вторичной структуры. Пептид 75-99 был синтезирован твердофазным методом, структурно охарактеризован с помощью спектроскопии CD и конъюгирован с белковым носителем. Новозеландские белые кролики были иммунизированы, а сыворотки были протестированы на наличие специфических антител к пептидам с помощью ИФА и вестерн-блоттинга. Наконец, был проведен тест ИФА с сывороткой человека.

Кролики, иммунизированные пептидом 75-99, вырабатывают антитела, которые распознают как пептид 75-99, так и рекомбинантный полипептид URG7. Более того, оба антигена позволили обнаружить антитела против URG7 в сыворотке здоровых и инфицированных HBV субъектов, хотя и с разным порогом дискриминации. Наши данные свидетельствуют о том, что анализ пептидного ИФА против специфической последовательности белка URG7 позволяет с хорошей чувствительностью и специфичностью обнаружить антитела против URG7 в сыворотке пациентов, инфицированных HBV.