Биохимия и аналитическая биохимия

Абстрактный

Идентификация основных белков очень стабильного высокомолекулярного мультипротеинового комплекса плацентарной ткани человека, обладающего девятью различными каталитическими активностями

Евгения Е Буркова, Павел С Дмитренок, Дмитрий В Булгаков, Евгений А Ермаков, Валентина Н Бунева, Светлана Е Соболева1 и Георгий А Невинский*

Плацента человека — это орган, защищающий, питающий и регулирующий формирование бороздок эмбриона. Поэтому идентификация и характеристика компонентов плаценты, включая белки и их мультипротеиновые комплексы, является важным шагом к пониманию функции плаценты. Здесь мы впервые проанализировали чрезвычайно стабильный мультипротеиновый комплекс (SPC, ~1000 кДа) человеческой плаценты с помощью MALDI MS и MS/MS спектрометрии с использованием триптических гидролизатов белков после разделения белков с помощью SDS-PAGE и 2-D электрофореза. Образование такого очень стабильного комплекса из-за случайной ассоциации нескольких различных белков очень маловероятно. Было показано, что SPC содержат двенадцать белков: гемоглобин, щелочную фосфатазу, цитоплазматический актин, сывороточный альбумин человека, хорионический соматомаммотропиновый гормон, белок теплового шока бета-1, пероксиредоксин-1, 78 кДа глюкозо-регулируемый белок, протеиндисульфидизомеразу А3, серотрансферрин, аннексин А5 и IgG. Эти двенадцать белков сами по себе имеют много различных и важных биологических функций, которые могут быть присущи этим белкам в комплексе. Кроме того, комплекс продемонстрировал девять различных ферментативных активностей: ДНКазу, РНКазу, АТФазу, фосфатазу, протеазу, амилазу, каталазу, пероксидазу (H2O2-зависимую) и оксидоредуктазу (H2O2-независимую). Эффективность катализа каждой из этих реакций препаратами SPC из трех плацент была сопоставимой. Было показано, что гидролиз r(pU)23, r(pA)23 и r(pC)23 приводит к образованию 1-22-мерных олигонуклеотидов, тогда как переваривание микроРНК mirR137 является сайт-специфичным (3A-4U > 9U-10A > 8U-9U ≥ 15U-16A), в результате чего образуются только четыре основных продукта. Рассмотрено большое количество потенциально возможных функций комплекса в соответствии с функциями его отдельных белков. Прогресс в изучении комплексов плацентарных белков может способствовать пониманию их биологических функций.