Журнал исследований и разработок в области аквакультуры

Абстрактный

Идентификация и эффективное использование антибиотиков для разработки стабильной системы трансформации в Porphyra yezoensis (Bangiales, Rhodophyta)

Мегуму Такахаси, Кодзи Миками, Хироюки Мизута и Наоцуне Сага

Несмотря на развитие транзиентной экспрессии генов в красных водорослях вида Porphyra, стабильная система трансформации у этих водорослей пока не установлена. Одной из причин сложности трансформации является отсутствие способа отбора трансформированных клеток из водорослей. Таким образом, для определения антибиотиков, подходящих для отбора стабильно трансформированных клеток, мы протестировали гаметофит на чувствительность к 6 антибиотикам: ампициллину (Am), канамицину (Km), гигромицину (Hm), генетицину (G418), хлорамфениколу (Cm) и паромомицину (Pm), которые часто используются в качестве селекционных агентов при трансформации наземных растений и микроводорослей. Тесты на чувствительность, которые проводились с различными концентрациями (0-10 мг мл-1) антибиотиков, показали, что Hm, G418, Cm и Pm проявляли летальный эффект при более чем 1,0 мг мл-1, что предполагает пригодность этих четырех антибиотиков для отбора генетически трансформированных клеток из гаметофитов P. yezoensis, в то время как гаметофиты P. yezoensis были высокоустойчивы к Am и Km. Нам также удалось снизить концентрации антибиотиков, снизив значение pH и концентрацию соли с помощью искусственной синтетической среды. Повышение чувствительности гаметофитных клеток к Hm, G418, Cm и Pm в модифицированной синтетической среде будет способствовать созданию системы генетической трансформации в P. yezoensis.