Берра Коскулу, Абха Чоудхари, Ханна Джонсон, Хёк Чо и Мадхусудан Чоудхари
Репликация ДНК была тщательно изучена у ряда видов бактерий, которые обладают однокомпонентным геномом, состоящим из одной кольцевой хромосомы. Примерно 10% секвенированных видов бактерий имеют многокомпонентную структуру генома, состоящую из нескольких хромосом. Однако координация и регуляция многохромосомной репликации у бактерий остаются плохо изученными. Rhodobacter sphaeroides обладает многокомпонентным геномом, состоящим из двух хромосом, первичной хромосомы (CI) размером приблизительно 3 Мб и вторичной хромосомы (CII) размером 0,9 Мб. Анализы Z-кривой и GC-скоса показали, что CI и CII R. sphaeroides демонстрируют три и пять предполагаемых областей хромосомного происхождения соответственно. Затем фланкирующие области этих предполагаемых областей были дополнительно проанализированы с точки зрения сохранения генов, плотности генов и соотношений генов между соответствующими прямыми и комплементарными цепями, ранее идентифицированными вблизи биологически подтвержденных репликативных источников бактериальных видов, которые были тесно связаны с R. sphaeroides. Впоследствии все предполагаемые репликаторные области были клонированы в плазмиду pLO1, суицидный вектор в R. sphaeroides. Автономная репликация этих рекомбинантных плазмид в R. sphaeroides была дополнительно исследована с использованием конъюгации и молекулярных методов. Результаты показали, что CI и CII R. sphaeroides имеют один источник репликации на своих хромосомах, соответственно, и это обеспечит основу для будущей работы по координации и контролю репликации и сегрегации нескольких хромосом у бактерий.