Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Рекомендации по оптимизации выживаемости и миграционных возможностей мезенхимальных стволовых клеток лошадей

Сара Брукс, Синтия де Врис, Марк Сулс, Дебора Дж. Гест и Ян Х. Спаас

Предыстория: Хотя терапия мезенхимальными стволовыми клетками (МСК) широко используется в ветеринарии , не описано никаких конкретных рекомендаций, гарантирующих оптимальную выживаемость и миграцию клеток. Однако это необходимо для обеспечения оптимального клинического использования. Методы: В настоящем исследовании были выделены и охарактеризованы МСК, полученные из периферической крови лошадей (ПК). Чтобы определить оптимальные параметры для долгосрочной криоконсервации , было оценено влияние различных концентраций диметилсульфоксида (ДМСО) (5-20%) и методов размораживания (контролируемая температура или размораживание вручную) на жизнеспособность МСК с помощью окрашивания трипановым синим. После этого хранение МСК оценивалось в течение 12 месяцев с использованием только 10% ДМСО в качестве криопротектора без контролируемой скорости замораживания. Затем было оценено влияние часто используемых анестетиков и инъекционных гелей на жизнеспособность МСК. Наконец, была оценена способность МСК к миграции через гиалуроновую кислоту в различных концентрациях. Результаты: Во-первых, мы продемонстрировали, что концентрация ДМСО и метод размораживания не оказали существенного влияния на жизнеспособность МСК в течение 4 часов после размораживания. Во-вторых, анестетики были высокоцитотоксичны, и только 10% МСК выжили в течение 3 часов их присутствия. Гели на основе гиалуроновой кислоты и гликозаминогликанов были совместимы с МСК и обеспечивали высокую выживаемость клеток (более 90%) в течение 48 часов наблюдения. Однако в полиакриламидном геле примерно 80% МСК погибли в течение 48 часов. Наконец, концентрация геля повлияла на миграционную способность МСК. Действительно, только 60% МСК в 20 мг/мл гиалуроновой кислоты прикрепились к подлежащей поверхности в течение 48 часов, тогда как почти 100% МСК в 10 мг/мл того же вещества смогли мигрировать через гель. Заключение: В настоящем исследовании представлены практические рекомендации по клиническому применению МСК, полученных из лошадиного ПК.