Дж. Алекс Пастернак, Сью Хон Нг, Тобиас Кайзер, Франсуа Меренс и Хизер Л. Уилсон
Мононуклеарные клетки периферической крови свиньи (PBMC) и мононуклеарные клетки собственной пластинки (LPMC), стимулированные митогенами ex vivo, могут показывать значительную вариацию от животного к животному, что приводит к трудностям в интерпретации ответов у аутбридинговых видов животных. Смешанные популяции клеток стимулировали ex vivo 2,5 мкг/мл Con A или 2,5 нг/мл PMA плюс 250 нг/мл иономицина (PMAi; (только LPCM)) или только средой в течение 72 часов. Затем супернатанты тестировали на продукцию цитокинов с помощью анализа Bioplex для свиных IFNα, IFNγ, IL-10 и IL-12. Нестимулированные PBMC имели значительные уровни IL-10, и медианное значение для этой группы снижалось в присутствии Con A. Однако Con A индуцировал продукцию IFNα и IFNγ, но не IL-12 в этой популяции клеток. Напротив, нестимулированные и стимулированные Con A LPMC продуцировали незначительное количество IL-10, IFNα, IFNγ, и большинство LPMC животных показали незначительную продукцию IL-12 в ответ на Con A. Напротив, LPMC, стимулированные PMAi, продуцировали IFNγ, что предполагает, что продукция цитокинов является митоген-специфической реакцией. Когда мы отслеживали специфичные для животных ответы, мы наблюдали, что отдельные подгруппы PBMC животных реагировали на Con A значительно увеличенной или уменьшенной продукцией IL-10 по сравнению с нестимулированными клетками. Кроме того, в LPMC некоторые клетки не продуцировали IL-12 в ответ на Con A, но показали повышенную продукцию в ответ на PMAi, в то время как другие показали продукцию IL-12 в ответ на Con A, но не ответили на PMAi. Анализ проточной цитометрии показал, что PBMC представляли собой смесь CD3+ T-клеток>CD21+ B-клеток>CD172+ миелоидных клеток, тогда как LPMC состояли в основном из цитотоксических T-клеток и естественных клеток-киллеров. Процент CD8α+CD4+ антиген-опытных T-клеток был выше в LPMC по сравнению с PBMC. Как и ожидалось у аутбредных видов, существуют специфичные для животных различия в продукции цитокинов в ответ на стимуляторы, которые могут затруднить интерпретацию результатов, если не отслеживать их индивидуально.