Биология и медицина

Абстрактный

Получение и характеристика антител IgY от кур породы Ломанн Браун, иммунизированных сальмонеллами, для их последующего применения в нанотерапии

Гордон Дж., Моран Дж., Аяла Л., Секкат Р., Фернандес Р. и Торрес М.

Сальмонеллез — распространенный тип пищевого отравления, вызываемого бактерией Salmonella enterica. Это заболевание распространено в Эквадоре и распространяется через домашнюю птицу. Новой альтернативой для борьбы с инфекцией у людей и животных является пассивный иммунитет. Следовательно, специфические антитела могут быть разработаны в качестве терапевтических агентов на основе биоразлагаемых липосом наночастиц. Специфические антитела производятся путем инокуляции кур специфическими антигенами с последующим извлечением антител, накопленных в желтке. Целью данной работы было очищение специфических антител IgY против Salmonella spp от кур Lohmann Brown. Группа кур была иммунизирована пулом Salmonella enterica subsp enterica serovar Enteritidis и Salmonella enterica subsp enterica serovar Infantis. Эти два пула бактерий были предварительно инактивированы обработкой (T1) формальдегидом или обработкой (T2) нагреванием. Липиды удаляли с помощью 0,1% пектина, белок, осажденный сульфатом аммония (35% м/о), ресуспендировали в буфере PB 0,025M pH 8. Общие антитела IgY очищали с помощью DEAE-целлюлозы. Самый высокий выход общего IgY составил 5,5 мг IgY/мл желтка после обработки (T2) на 63 день после иммунизации. Характеристика проводилась с помощью методов ELISA и MABA, а иммунореактивность оценивалась с помощью вестерн-блоттинга в общей антисыворотке и очищенном белке, гибридизированном с коммерческими антикуриными антителами от SIGMA. Были визуализированы тяжелая цепь 67 кДа и легкая цепь 25 кДа. Такие антитела могли бы обеспечить быструю и немедленную защиту от нескольких биомишеней, новый IgY имеет потенциал для нанотерапии против заболеваний сальмонеллезом.