Журнал патологии растений и микробиологии

Абстрактный

Генная трансформация растений люцерны ( Medicago varia L.) отечественного сорта «Бургалтай» для увеличения размера листьев

Ууганзая Мягмарджав*, Энхчимег Ванджилдорж, Алтанцецег Хаджидсурен

Сорт люцерны «Бургалтай» является самым важным кормом в Монголии, и его урожайность снизилась в последние десятилетия из-за перекрестного опыления. Это исследование было проведено для увеличения размера листьев сорта «Бургалтай» посредством генетической трансформации, опосредованной Agrobacterium, путем переноса гена фактора регуляции роста AtGRF2 Arabidopsis thaliana. Регенерация in vitro была получена из семидневных эксплантатов гипокотиля и семядолей для индукции каллуса. Индуцированные каллусы использовались для индукции побегов и пролиферации. Пролиферированные побеги переносились в среду для индукции корней. Лучшей средой для индукции каллусов была среда MSB5 (среда Мурасиге-Скуга с витамином Гамборга), дополненная 2 мг/л 2,4-Д, 0,2 мг/л БАП и 1 мг/л НУК, средой для индукции побегов и пролиферации каллусов была среда MSB5, дополненная 1 мг/л БАП, 0,1 мг/л НУК, пролиферированные побеги укоренялись на половинной концентрации среды MSB5, дополненной 0,5 мг/л НУК. Для генетической трансформации в качестве исходного источника использовались экспланты гипокотиля. Всего было протестировано 235 эксплантов на трансформацию, и 30 эксплантов (12,7%) оказались устойчивыми к антибиотикам гигромицину и регенерировали растения. Растения были перенесены в почву, а свежие молодые листья использовались для гистохимического анализа GUS и ОТ-ПЦР для подтверждения. Среди них были подтверждены полностью регенерированные семь независимых трансгенных растений (T6, 8, 11, 12, 13, 15, 22). Трансгенный сорт люцерны 'Burgaltai' размер листьев был увеличен на 0,7 см ² по сравнению с диким типом. Линии T6 и 11 показали соотношение расщепления 3:1 в потомстве T1 (X2=0,04-0,42, p ≤ 0,52-0,84).