Журнал исследований и терапии стволовых клеток

Абстрактный

Foxd1-зависимые и независимые пути перепрограммирования фибробластов в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки или кардиомиоциты

Шу Накао, Тасуку Цукамото, Дай Ихара, Юкихиро Харада, Томоэ Уэяма, Томоаки Исида, Тихиро Токунага, Томоми Акама, Такахиро Сого и Терухиса Кавамура

Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSC) могут дифференцироваться в любой тип клеток. Кардиомиогенез из iPSC полезен для клинического применения при регенерации миокарда. Однако эффективность и продолжительность получения iPSC и кардиомиоцитов, полученных из iPSC, должны быть улучшены. Ранее мы продемонстрировали, что профиль поверхностных маркеров Sca1 ^- CD34 ^- или Foxd1+ во время процесса репрограммирования является предиктором успешного формирования iPSC. Здесь мы изучаем корреляцию осуществимости в качестве предикторов iPSC между популяциями клеток Sca1 ^- CD34 ^- и Foxd1+ и их возможность в качестве предикторов трансдифференцировки кардиомиоцитов. Анализ отслеживания судьбы показал, что большинство колоний iPSC были сформированы из GFP-позитивных клеток, в которых Foxd1 был трансактивирован в средней или поздней фазе процесса репрограммирования. Кроме того, экспрессия GFP наблюдалась в основном в популяции клеток Sca1 ^- CD34 ^- . Таким образом, Foxd1+ может быть индикатором успешного перепрограммирования в iPSC, в основном полученные из клеток Sca1 ^- CD34 ^- . Что касается сердечной трансдифференцировки, перепрограммируемые клетки были отсортированы на основе паттерна экспрессии Sca1 и CD34, что привело к более высокой частоте агрегатов пульсирующих клеток, полученных из популяции Sca1 ⁺ CD34 ⁺ , которая экспрессирует меньше GFP, управляемого промотором Foxd1, и содержала очень мало недифференцированных iPSC. Более того, маркер кардиомиоцитов α-актинин лишь частично колокализовался с экспрессией GFP в агрегатах, полученных из клеток Sca1 ⁺ CD34 ⁺ или Sca1 ^- CD34 ^- . Следовательно, Sca1 ⁺ CD34 ⁺ может быть лучшим источником клеток для создания кардиомиоцитов, независимых от Foxd1, несмотря на неудачную популяцию клеток перепрограммирования.