Журнал патологии растений и микробиологии

Абстрактный

Разработка нового метода стерилизации поверхности и питательной среды для выделения эндофитных актиномицетов из лекарственных растений и их антибактериальной активности

Вахида К. и Шьям К.В.

Эндофитные актиномицеты из лекарственных растений сообщались редко по сравнению с актиномицетами из почвенных и морских источников. Представленные результаты коррелируют наличие эндофитных актиномицетов в лекарственных растениях путем их выделения из трех лекарственных растений, а именно Ocimum basillicum, Withania somnifera и Rauvolfia tetraphylla. В настоящей работе метод и среда стерилизации поверхности были стандартизированы, и 32 эндофитных актиномицета были выделены из трех лекарственных растений. Мы оценили эффективность четырех различных методов стерилизации поверхности и четырех сред для выделения эндофитных актиномицетов. Метод с использованием гипохлорита кальция, гидрокарбоната натрия и азида натрия (новый метод) оказался более эффективным в устранении эпифитных микроорганизмов. Среди четырех протестированных сред крахмально-казеиновый агар (SCA) оказался лучшей средой для выделения эндофитных актиномицетов. Нам удалось получить быстрый и роскошный рост чистой культуры эндофитных актиномицетов на модифицированном ISP-4 (M) (агар с неорганическим солевым раствором) по сравнению со стандартным ISP-4(S). Предварительный антибактериальный анализ всех изолятов был проверен с помощью теста на конфронтацию. Вторичный скрининг выбранных изолятов был проверен с помощью диско-диффузионного теста с использованием экстракта этилацетата, который показал широкий спектр антибактериальной активности против тестовых человеческих патогенов. На основании морфологических и фенотипических признаков 12 изолятов были идентифицированы как Streptomyces spp. Среди 12 изолятов A3 как представитель был охарактеризован с помощью SEM и идентифицирован с помощью анализа 16SrRNA как Streptomyces flavoviridis A3WK, он показал значительную антибактериальную активность против тестового человеческого патогена. Это первый отчет об успешной изоляции эндофитных актиномицетов из указанных лекарственных растений с использованием недавно разработанного метода стерилизации поверхности и нового сравнительного исследования на среде ISP-4.